乙肝病毒核酸标准物的测定.doc

摘要:针对目前市场上乙肝病毒核酸检测试剂盒种类繁多，缺乏统一标准的问题。本文通过优化引物和探针和反应体系，用荧光定量PCR法来准确测量乙肝病毒核酸生物标准品。结果：优化了PCR体系和PCR程序；将质粒稀释到107copy/ml浓度，分装成250单元，通过对瓶内、瓶间的数据分析及t检验，证明F<F0.05(15,30)，即分装后的质粒溶液管间均匀性无显著性差异；在-70°C、-20°C、4°C的条件下可以稳定保存一个月，在25°C温度下可以稳定保存2周时间，37°C温度下可以稳定保存1周时间；乙肝病毒标准品定值结果为Ct值14.50，RSD为0.20%。结论：该标准品可以作为市场上乙肝病毒检测试剂盒标准。

关键词：乙型肝炎病毒；生物标志物；标准物质；荧光定量PCR

目录

摘要

Abstract

引   言-1

1材料和方法-2

1.1主要仪器-2

1.2 主要试剂和材料-2

1.3方法-3

1.3.1乙肝病毒DNA检测PCR体系优化-3

1.3.2标准品的制备-4

1.3.2.1标准品的配制-4

1.3.2.2标准品均匀性测定-4

1.3.3稳定性实验-4

1.3.4定值-4

2 结果-5

2.1乙肝病毒DNA检测PCR体系优化-5

2.2标准品均匀性-5

2.3标准品稳定性-7

2.4定值-8

3 讨论-9

结   论-10

致   谢-11

参考文献-12

附录A乙肝病毒核酸标准品稳定性检验数据-13