黑曲霉植酸酶对豆粕中植酸的脱磷作用_生物工程.doc

摘要:单胃动物不能有效利用植物性饲料中的磷，因为磷主要以植酸磷的形式存在。通常通过在饲料中添加植酸酶，水解植酸脱磷，来提高动物对磷的利用率。本实验利用黑曲霉发酵产生的植酸酶粗酶液对豆粕中的植酸进行脱磷作用的研究。通过单因素试验和正交试验确定植酸酶水解豆粕中植酸的最适条件为：酶加量为160U，底物浓度为60mg/mL，pH为4，温度为55℃。最优条件下，豆粕中植酸的水解率为87.34%。

关键词植酸酶；黑曲霉；豆粕；磷

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 植酸酶简介-1

1.1.1 植酸酶的作用-1

1.1.2 植酸酶的应用-1

1.1.3 植酸酶的生产背景-3

1.2 酸性植酸酶简介-3

1.2.1 植酸酶的分类-3

1.2.2 酸性植酸酶的作用及应用-4

1.3植酸酶脱磷方面的研究情况-4

1.4豆粕-4

1.5 本论文研究的意义和研究内容-4

1.5.1 本论文研究意义-5

1.5.2 本论文研究内容-5

2 材料与方法-6

2.1 实验材料-6

2.1.1供试菌种-6

2.1.2 主要仪器-6

2.1.3 主要试剂-7

2.2 实验方法-8

2.2.1 斜面活化-8

2.2.2 液体发酵-8

2.2.3 粗酶液的制备-8

2.2.4 酶活测定-8

2.2.4.1 标准曲线的绘制 -8

2.2.4.2 粗酶液酶活的测定 -9

2.2.4.3 粗酶液酶活的计算 -10

2.2.5 磷浓度的测定-10

2.2.5.1工作曲线的绘制-11

2.2.5.2测定总磷和无机磷样品的处理-11

2.2.5.3分解液和经粗酶液浸泡的豆粕上清液中磷的测定-11

2.2.6脱磷条件的优化-12

2.2.6.1脱磷条件的优化-12

2.2.6.2 正交实验-12

2.2.7 最优条件下豆粕中磷释放量随时间的关系-13

3 实验结果与分析-14

3.1 单因素实验-14

3.1.1不同酶加量对无机磷含量的影响 -14

3.1.2 不同底物浓度对无机磷含量的影响-14

3.1.3 不同温度对无机磷含量的影响-15

3.1.4 不同pH对无机磷含量的影响-15

3.2 正交实验-15

3.3 验证实验-16

3.4 在最优条件下考察磷释放量随时间的变化-17

3.5 植酸水解率-17

结论-18

致谢-19

参考文献-20