芽孢杆菌SH-1菌株抗菌物质分离纯化.doc

摘要:芽孢杆菌为好养或兼性厌氧的杆菌，一般为革兰氏染色阳性。芽孢杆菌在自然界中广泛存在，对人畜无毒无害，能产生多种抗菌物质和酶。随着经济的发展，对在工、农、医等方面有重大应用价值的芽孢杆菌资源的开发利用更具有重要意义。本研究拟通过生理生化和16SrRNA对芽孢杆菌SH-1菌株进行鉴定，初步鉴定为蕈状芽孢杆菌或炭疽芽孢杆菌。提取此菌发酵过程中产生的抗菌物质，采用抑菌圈法初步研究其抗菌特性，并对此抗菌物质进行进一步的分离纯化，通过硫酸铵分级沉淀、树脂吸附分离纯化、葡聚糖凝胶分离纯化，最终确定通过树脂吸附能够分离出抗菌活性成分。而其他两种方法没有分离出抗菌活性物质。

关键词    芽孢杆菌；抗菌物质；分离纯化；鉴定

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 芽孢杆菌的研究-1

1.1.1 芽孢杆菌的研究现状-1

1.1.2 芽孢杆菌属的分类特征-1

1.1.3 芽孢杆菌的种类鉴定-1

1.2 抗菌蛋白-2

1.2.1 芽孢杆菌属抗菌蛋白-2

1.2.2 芽孢杆菌抗菌蛋白的基因克隆-2

1.2.3 抗菌蛋白的分离纯化-3

1.3 芽孢杆菌的应用-3

1.3.1 芽孢杆菌在农业上的应用-3

1.3.2 芽孢杆菌在工业上的应用-4

1.3.3 芽孢杆菌在医学上的应用-4

1.4 实验目的及意义-4

2 材料与方法-5

2.1 实验材料-5

2.1.1 主要原料与试剂-5

2.1.2 主要仪器设备-6

2.2 实验方法-7

2.2.1 菌种鉴定-7

2.2.2 菌种活化-8

2.2.3 发酵液的制备-8

2.2.4 抑菌实验-8

2.2.5 抗菌物质稳定性研究-8

2.2.6 抗菌物质的分离纯化-8

3 实验结果分析-10

3.1 菌种鉴定-10

3.1.1 生理生化特征-10

3.1.2 16SrRNA序列分析研究-10

3.2 抗菌物质稳定性研究-12

3.2.1 抗菌物质对紫外线的稳定性-12

3.2.2 抗菌物质对高温（121℃）的稳定性-13

3.2.3 抗菌物质对蛋白酶的稳定性-13

3.3 抗菌物质的分离纯化-14

3.3.1 硫酸铵沉淀-14

3.3.2 酸沉-14

3.3.3 树脂吸附分离纯化-15

3.3.4 葡聚糖凝胶分离纯化-16

结论-17

致谢-18

参考文献-19