氯化锂诱变灵芝原生质体高产多糖灵芝菌株及扩大试验.doc

摘要:本文采用深沉发酵技术，用0.03%LiCl诱变灵芝原生质体，发酵培养，测定胞外多糖含量，探讨酶法提取胞外多糖条件，同时进行扩大试验。结果表明，出发株胞外多糖含量为1.97mg/mL，经0.03%LiCl诱变胞外多糖含量为9.61mg/mL，诱变后比出发株提高了487.82%；木瓜蛋白酶最佳提取条件为：加酶量1.5%、酶解时间80min、酶解温度50℃、pH7.0；纤维素酶最佳提取条件为：加酶量1.5%，酶解时间 80min，酶解温度是55℃，pH5.0。扩大试验：罐压在0.05MPa左右，转速150r/min，通气量在1050L/h，温度在250C-270C之间，培养1-9天。随着时间的增加，发酵液中多糖含量逐渐增加，到第8天趋于平缓，最高可达8.31mg/mL，比出发株提高421.83%。

关键词 灵芝；氯化锂；诱变；多糖；扩大试验

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 灵芝的概况-1

1.2 灵芝的化学成分及功能-1

 1.2.1灵芝多糖的功能及结构-2

1.3 诱变的原理和概念-2

1.4 原生质体-2

 1.4.1 原生质体的特点-2

 1.4.2 原生质体技术-3

1.5 原生质体诱变方法-3

 1.5.1 诱变育种的概念-3

 1.5.2 诱变育种的分类-3

1.7 意义-4

2 材料与方法-5

   2.1.1 试验菌种-5

2.1.2 培养基-5

2.1.3 试剂-5

2.1.4 仪器设备-6

2.2 实验方法-6

2.2.1 灵芝菌种的活化与培养-6

2.2.2 灵芝诱变的方法-6

2.2.5酶法提取胞外多糖-8

  2.2.6 扩大试验-9

3 结果与讨论-10

3.1灵芝菌种发酵液多糖含量的测定-10

3.2酶法提取胞外多糖条件选择-10

3.2.1酶种类的选择-10

3.3酶法提取灵芝发酵液中多糖-11

3.3.1木瓜蛋白酶-11

3.3.2纤维素酶-13

3.3扩大试验中灵芝发酵液多糖含量的测定-15

3.3.1第一次扩大试验-15

3.4.2第二次扩大试验-16

结论-17

致谢-18

参考文献-19