超声波提取硅胶柱分离王不留行中总皂苷_制药工程.doc

摘要:目的: 对王不留行中抗肿瘤新生血管皂苷类活性物质进行提取与分离的工艺优化。

方法：以齐墩果酸为对照品，分光光度法测定王不留行中总皂苷含量；以王不留行干粉得率和总皂苷含量为评价指标，选取提取次数，料液比，乙醇浓度，超声时间，超声功率五个实验因素对超声波提取王不留行总皂苷的工艺进行优化；根据TLC分离结果初步得出较优的洗脱剂配比，对超声波提取所得粗皂苷进行硅胶柱分离；SRB法检测总皂苷的活性。

结果：超声波提取较优工艺条件为：以料液比为1:15、乙醇浓度为70%、超声时间为40min、超声功率为80%，提取两次时提取效果最好；硅胶柱层析较优分离条件为：流速为0.8mL/min，上样量与硅胶量比值为1:210，上样量与拌样硅胶量比值为1:10，以氯仿:甲醇:水(14:4:1，65:35:10，14:14:3)进行梯度洗脱，洗脱效果较好，分离得到的含皂苷干粉得率为56.88%，干粉中总皂苷含量为16.11%，总皂苷样品的IC50值为4.41μg/ml。

结论：本研究中所得工艺中王不留行总皂苷的得率较高，活性较好

目录

摘要

ABSTRACT

第1章 绪论-1

1.1抗肿瘤药物的研究进展-1

1.1.1肿瘤新生血管的概述-1

1.1.2肿瘤血管生成抑制剂的介绍-1

1.2王不留行的研究-2

1.3 三萜皂苷的研究-3

1.4 超声波提取概述-4

1.4.1超声波提取的原理-4

1.4.2 超声波提取的特点-5

1.5 硅胶柱层析概述-6

1.6 研究意义-6

1.7 研究框架-7

第2章 材料与实验方法-9

2.1 药品试剂及仪器-9

2.1.1 材料-9

2.1.2 实验仪器-9

2.1.3实验试剂-9

2.2 实验方法-9

2.2.1实验前期准备-9

2.2.2分光光度法测定王不留行中总皂苷含量方法的建立-10

2.2.3干粉得率的测定-10

2.2.4单因素实验-10

2.2.5正交实验与验证实验-10

2.2.6 TLC选择洗脱剂的配比-11

2.2.7硅胶柱层析实验-11

2.2.8 SRB法测定细胞活性-12

第3章 结果与分析-13

3.1分光光度法测定王不留行中总皂苷含量方法的建立结果-13

3.2 超声波提取实验结果-13

3.2.1 提取次数单因素实验结果-13

3.2.2 料液比单因素实验结果-14

3.2.3乙醇浓度单因素实验结果-14

3.2.4超声时间单因素实验结果-15

3.2.5 超声功率单因素实验结果-16

  3.2.6 超声波提取正交实验结果-16

  3.2.7超声波提取工艺验证实验结果-17

3.3 TLC洗脱剂配比考察结果-17

3.4硅胶柱层析分离王不留行总皂苷实验结果-18

3.5细胞活性评价结果-19

第4章 结论与展望-21

4.1 结论-21

4.2 不足之处与展望-21

参考文献-23

致 谢-25