银杏叶发酵制备复合酶饲料添加剂的工艺优化.doc

摘要:以银杏叶为原料，通过比较不同曲霉在银杏中的增殖能力不同，选取增殖能力较强的黑曲霉、绿色木霉混合为菌种，固态发酵生产饲料添加剂，对发酵条件进行了优化，确定了最佳发酵工艺参数，同时对发酵产物中主要营养成分和活性成分进行了分析。结果表明，适宜的工艺参数为：含水量65%，发酵温度28℃，培养基初始pH5.0，装瓶量20g，接种量15%的条件下发酵96h，可获得较好的发酵结果，CMC酶活最高可达9.50U。发酵产物主要营养成分和生物活性成分分析表明蛋白质含量由原先的11.20%增加到23.49%，总黄铜和内酯提取率都有相应的增加。由此可以看出银杏叶通过微生物转化后营养丰富，生物活性增强。

关键词 银杏叶；固体发酵；发酵条件优化；CMC酶活力

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 银杏叶的成分及其功效-1

1.1.1 银杏叶的成分-1

1.1.2 银杏叶的药理功效-2

1.2 霉菌的特征和用途-3

1.2.1 黑曲霉-3

1.2.2 米曲霉-3

1.2.3 绿色木霉-4

1.3 微生物饲料添加剂及其用途-4

1.3.1 微生物饲料添加剂-4

1.3.2 微生物饲料添加剂的用途-4

1.4 银杏叶用于生物饲料的应用前景-5

1.5 研究的目的与意义-5

2 实验材料与方法-6

2.1 菌种-6

2.2 主要仪器-6

2.3 主要试剂与原料-6

2.4 培养基-7

2.5 培养方法-7

2.5.1 菌种的活化-7

2.5.2 固体发酵-7

2.6 菌种筛选-8

2.6.1菌种复活-8

2.6.2 霉菌形态特征观察-8

2.6.3 霉菌的淀粉酶活定性实验-8

2.6.4 不同搭配的菌种筛选-8

2.7 分析测定方法-8

2.7.1 还原糖含量和总糖含量的测定方法-8

2.7.2 CMC酶活和半纤维素酶活的测定-11

2.7.2.1 CMC酶活的测定-11

2.7.3 银杏黄酮含量测定方法-11

2.7.4 银杏内酯含量测定方法-11

2.7.5 银杏蛋白质含量测定方法-11

2.8发酵条件的优化-13

2.8.1含水量对产酶的影响-13

2.8.2 发酵时间对产酶的影响-13

2.8.3 发酵温度对产酶的影响-13

2.8.4 培养基初始pH对产酶的影响-13

2.8.5 装瓶量对产酶的影响-13

2.8.6 接种量对产酶的影响-13

2.8.7 固体发酵条件优化的正交优化-13

2.8.8 验证试验-14

2.9 发酵产物主要营养成分和生物活性成分分析-14

3 实验结果与讨论-15

3.1 筛选-15

3.1.1 霉菌的形态观察-15

3.1.2 霉菌的淀粉酶活定性实验结果-15

3.1.3 不同菌种搭配的筛选结果-15

3.2 发酵条件的优化-17

3.2.1 含水量的影响-17

3.2.2 发酵时间的影响-18

3.2.3 发酵温度的影响-20

3.2.4 初始pH 的影响-21

3.2.5 装瓶量的影响-23

3.2.6 接种量的影响-25

3.2.7 发酵条件的正交试验-26

3.3发酵产物营养成分与生物活性成分分析-27

结论-29

致谢-30

参考文献-31