野马追总黄酮的分离纯化研究.doc

摘要:[目的]首先分别采用多种大孔吸附树脂静态吸附野马追总黄酮，然后选择静态吸附效果最好的树脂对其进行动态吸附的最佳工艺参数的优化，最后再进行其动态洗脱最佳工艺参数的优化，以此确定分离纯化的最佳工艺参数。[方法]首先在同样的条件下，采用AB-8、NKA-9、HPD-826、HPD-722和HPD-750型大孔吸附树脂分别对酶解法提取好的野马追总黄酮进行了静态吸附动力学特性试验，计算出的吸附容量，吸附率，吸附树脂的洗脱率，通过比较得出最佳；然后把吸附效果最佳的大孔树脂用来进行总黄酮动态分离纯化实验，研究影响野马追总黄酮分离纯化的包括pH值、上样液浓度、上样液流速、洗脱液流速、洗脱剂用量在内的几个因素，主要用泄漏点来比较结果。 [结果]AB-8、NKA-9、HPD-826、HPD-722和HPD-750静态吸附的吸附率分别为82.30%、55.50%、64.87%、64.28%和64.85%，故以AB-8型树脂继续接下来的实验；AB-8型树脂动态吸附和洗脱野马追总黄酮后产品中总黄酮的纯度从23.16%提升为56.63%，提高了2.45倍，其中得到的最有条件为上样速度为2BV/h，pH值5.5，上样液浓度2.5mg/mL，洗脱液浓度70%乙醇，洗脱液流速2BV/h，洗脱剂用量3BV。[结论]采用AB-8型大孔吸附树脂分离纯化野马追总黄酮是可行的。

关键词：野马追；总黄酮；分离纯化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 野马追概述-1

1.2 总黄酮的概况-1

1.2.1 概述-1

1.2.2主要药理作用-1

1.3 总黄酮的检测方法-1

1.3.1 分光光度法-1

1.3.2 高效液相色谱法-2

1.3.3 毛细管电泳法-2

1.3.4 薄层扫描法-2

1.3.5 其他方法-2

1.4 总黄酮的提取方法-2

1.4.1 热水提取-2

1.4.2 有机溶剂提取-2

1.4.3 超声波提取-2

1.4.4 微波提取-3

1.4.5 超临界流体萃取-3

1.4.6 酶法提取-3

1.4.7 超滤法提取-3

1.5 总黄酮的分离纯化方法-3

1.5.1 柱层析法-3

1.5.2 重结晶法-3

1.5.3 高效液相色谱法-3

1.5.4 膜分离技术-4

1.6 本课题的研究意义及主要内容-4

2 材料与方法-4

2.1 原料与试剂-4

2.2 仪器与设备-5

2.3 方法-5

2.3.1 酶法提取-5

2.3.2 AB-8型大孔吸附树脂分离纯化-5

3 结果与分析-7

3.1 静态吸附洗脱试验-7

3.1.1 静态吸附洗脱试验-7

3.1.2 静态吸附曲线-7

3.2 动态吸附试验-8

3.2.1 动态吸附曲线的制作-8

3.2.2 上样液流速的影响-8

3.2.3 上样液pH值的影响-9

3.2.4 上样液浓度的影响-9

3.3 动态吸附曲线-10

3.4 动态洗脱试验-10

3.4.1 洗脱液浓度的影响-10

3.4.2 不同用量解析剂对洗脱效果的影响-11

3.4.3 不同解析流速对洗脱效果的影响-11

3.5 野马追纯度试验-12

结论-12

致谢-13