酶法提取杏鲍菇多糖及抗氧化活性研究.doc

摘要:采用水提法和酶法研究了杏鲍菇多糖提取的工艺条件，用苯酚一硫酸法测定多糖含量，用Sevag法脱蛋白对杏鲍菇多糖进行纯化，并对其抗氧化活性进行探讨。实验结果表明：水提最佳条件为料液比1:20，时间50min，温度30℃，多糖提取率为13.64%；酶法提取最佳工艺条件为加酶量为纤维素酶2.0%，酸性蛋白酶1.5%，料液比1:20，温度30℃，时间50min，多糖提取率为15.86%；酶法提取比水提取杏鲍菇多糖提取率提高了16.28%。采用Sevag法对杏鲍菇多糖进行纯化，粗糖纯度为53.33%，脱蛋白后多糖纯度为74.57%，多糖纯度提高了39.83%。杏鲍菇粗多糖、杏鲍菇精多糖、Vc对OH·有较强的清除能力，其50%清除率对应的杏鲍菇粗多糖、杏鲍菇精多糖和Vc浓度（IC50）分别为2.74mg/mL、2.28mg/mL、1.86mg/mL；对O2-·较强的清除能力，其50%清除率对应的杏鲍菇粗多糖、杏鲍菇精多糖和Vc浓度（IC50）分别为2.43mg/mL、1.68mg/mL、1.17mg/mL。杏鲍菇粗多糖，精多糖对OH·、O2-·、DPPH均有较强的清除能力，且随其浓度的增加清除率也逐渐增大；相同质量浓度粗多糖的清除效果大于精多糖，但都明显低于Vc。

关键词 杏鲍菇；多糖；纤维素酶；酸性蛋白酶；抗氧化活性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 食用菌-1

1.1.1 食用菌营养成分研究-1

1.2 多糖的概况-2

1.2.1 多糖的定义及分类-2

1.2.2 多糖的提取及分离纯化-2

1.2.3 多糖的生理功能-2

1.3 新型食用菌-杏鲍菇的概况-4

1.3.1 杏鲍菇的简介-4

1.3.2 杏鲍菇的营养价值-4

1.4 研究意义及内容-4

2 材料与方法-5

2.1 实验材料-5

2.1.1主要材料与试剂-5

2.1.1主要仪器-5

2.2.1杏鲍菇的预处理-6

2.2.2 水提取杏鲍菇多糖-6

2.2.3 酶提取杏鲍菇多糖-6

2.2.4 杏鲍菇多糖含量测定-6

2.2.5 葡萄糖标准曲线绘制-7

2.2.6杏鲍菇粗多糖的纯化-7

2.2.7 杏鲍菇多糖提取率的计算-8

2.2.8杏鲍菇多糖清除自由基实验-8

3 结果与讨论-10

3.1水提取杏鲍菇多糖工艺条件的选择-10

3.1.1 温度对杏鲍菇多糖提取率的影响-10

3.1.2 时间对杏鲍菇多糖提取率的影响-10

3.1.3 料液比对杏鲍菇多糖提取率的影响-11

3.2水提法提取杏鲍菇多糖的正交实验-11

3.3酶法提取杏鲍菇多糖工艺条件的选择-12

3.3.1 纤维素酶加酶量对杏鲍菇多糖提取率的影响-12

3.3.2 酸性蛋白酶加酶量对杏鲍菇多糖提取率的影响-13

3.3.3 温度对杏鲍菇多糖提取率的影响-14

3.3.4料液比对杏鲍菇多糖提取率的影响-14

3.3.5 时间对杏鲍菇多糖提取率的影响-15

3.4 酶提法提取杏鲍菇多糖的正交实验-16

3.5脱蛋白前后多糖纯度-16

3.5.1 粗多糖纯度-16

3.5.2 脱蛋白后的多糖纯度-17

3.6 杏鲍菇多糖对自由基的清除效果-17

3.6.1 杏鲍菇多糖对OH·清除效果-17

3.6.2 杏鲍菇多糖对O2-·的清除效果-18

3.6.3 杏鲍菇多糖对DPPH的清除效果-19

结论-21

致谢-22

参考文献-23

附录-25