共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖工艺研究.doc

摘要:实验采用海藻酸钠和氯化钙对灵芝、金针菇细胞进行共固定化，研究包埋法共固定化灵芝、金针菇细胞工艺条件，探讨共固定化培养条件。实验结果表明：共固定化灵芝、金针菇细胞的最佳工艺条件为海藻酸钠浓度5.0%，氯化钙浓度2.1%，接种量（海藻酸钠与菌种之比）1:1；共固定化灵芝、金针菇细胞的最佳培养条件为pH值8.5胞外多糖产量5.207μg/mL，温度24℃胞外多糖产量7.609μg/mL，培养时间10d胞外多糖产量5.841μg/mL，接种50个固定化小球可重复使用六次，培养好的菌种可放入4℃的冰箱中保存。

关键词 灵芝；金针菇；共固定化；胞外多糖；海藻酸钠；氯化钙

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 灵芝的概况-1

1.1.1 灵芝的营养成分-1

1.1.2 灵芝的保健功能-1

1.2 金针菇的概况-1

1.2.1 金针菇的营养成分-2

1.2.2 金针菇的保健功能-2

1.3 食用菌多糖-2

1.3.1 灵芝多糖-2

1.3.2 金针菇多糖-2

1.4 多糖的提取与检测-3

1.4.1 多糖提取的方法-3

1.4.2 多糖检测的方法-3

1.5 固定化技术-4

1.5.1 固定化技术的发展-4

1.5.2 固定化细胞的方法-4

1.6 研究的目的及意义-5

2 材料与方法-6

2.1 实验试剂与仪器-6

2.1.1 实验试剂-6

2.1.2 实验仪器-6

2.2 实验方法-7

2.2.1 实验材料-7

2.2.2 菌种活化与培养-7

2.3 共固定化灵芝、金针菇细胞小球的制备-7

2.4 胞外多糖的提取与检测-7

2.4.1 葡萄糖标准曲线的制作-7

2.4.2 胞外多糖的提取-8

2.4.3 胞外多糖含量的测定-8

2.5 灵芝、金针菇细胞共固定化工艺-8

2.5.1 探索最佳海藻酸钠浓度-8

2.5.2 探索最佳氯化钙浓度-8

2.5.3 探索最佳接种量-8

2.6 灵芝、金针菇细胞共固定化培养-9

2.6.1 探索最佳pH值-9

2.6.2 探索最佳温度-9

2.6.3 探索最佳培养时间-9

2.6.4 探索最佳稳定性-9

2.6.5 探索最佳保存条件-10

3 结果与讨论-11

3.1 葡萄糖标准曲线-11

3.2 共固定化灵芝、金针菇细胞工艺条件的选择-11

3.2.1 海藻酸钠浓度对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-11

3.2.2 氯化钙浓度对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-13

3.2.3 接种量对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-15

3.3 共固定化灵芝、金针菇细胞培养条件的选择-16

3.3.1 pH值对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-16

3.3.2 温度对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-17

3.3.3 培养时间对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-18

3.3.4 稳定性对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-20

3.3.5 共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖的最佳工艺条件-21

3.3.6 保存条件对共固定化灵芝、金针菇细胞产胞外多糖影响-23

结论-24

致谢-25

参考文献-26

附录-28