银杏叶复合酶饲料添加剂发酵培养基的优化.doc

摘要:以银杏叶为主要原料，添加黄芪作辅助原料，黑曲霉与绿色木霉混合为菌种，固态发酵生产饲料添加剂。对固体发酵培养基的组成进行了优化，确定了最佳的固体培养基的组成，对产物中的主要活性成分以及营养成分进行了分析。研究表明,最佳的发酵培养基组成为：2.5%的葡萄糖作为碳源，2.5%的尿素作为氮源，添加Ca2+作为无机盐添加离子，银杏叶黄芪比例7:3的条件下28 ℃恒温培养发酵72 h，可获得较好的发酵结果，纤维素酶活可达34.068 U/g，半纤维素酶活可达101.044 U/g。在对发酵产物主要营养成分和生物活性成分分析后发现黄酮含量提高了0.21%，内酯含量提高了0.97%，蛋白质含量提高了13.42%。由此可以看出银杏叶通过生物转化后营养丰富，生物活性增强。从而为复合型、多功能型银杏叶生物饲料添加剂的深入研究与开发利用打下了基础。

关键词 银杏叶；黄芪；固体发酵；还原糖；总糖；纤维素酶活力；半纤维素酶活力

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 微生物饲料添加剂-2

1.1.1 种类-2

1.1.2 作用-2

1.2 银杏叶-3

1.2.1 化学成分-3

1.2.2 医药功效-4

1.3 黄芪-5

1.4 菌种-6

1.4.1 黑曲霉-6

1.4.2 绿色木霉-6

1.5 研究目的与意义-7

2 实验材料与方法-8

2.1 菌种-8

2.2 主要仪器-8

2.3 主要试剂与原料-8

2.4 培养基-9

2.4.1 活化培养基-9

2.4.2 固体发酵培养基-9

2.5 培养方法-9

2.5.1 菌种活化-9

2.5.2 固体发酵培养基及其培养-10

2.6 分析测定方法-11

2.6.1糖含量及酶活力的测定方法-11

2.6.2 银杏叶黄酮含量测定方法-13

2.6.3 银杏叶内酯含量测定方法-14

2.6.4 银杏叶蛋白质含量测定方法-14

2.7 固体发酵培养基的优化-14

2.7.1 碳源种类的影响-14

2.7.2 碳源添加量的影响-14

2.7.3 氮源种类的影响-15

2.7.4 氮源添加量的影响-15

2.7.5 银杏叶黄芪比例的影响-15

2.7.6 无机盐种类的影响-15

2.7.7 培养基优化正交试验-16

2.7.8 验证试验-16

2.8 产物主要成分测定-16

3 实验结果与讨论-17

3.1 发酵培养基的优化-17

3.1.1 碳源种类的选择-17

3.2.2 碳源含量的确定-18

3.2.3 氮源种类的选择-19

3.2.4 氮源含量的确定-20

3.2.5 银杏叶黄芪比例的确定-21

3.2.6 无机盐种类的选择-23

3.2.7 培养基优化正交试验-24

3.2.8 验证试验-25

3.3 产物主要成分测定-26

结论-27

致谢-28

参考文献-29