ORAC法评价蟹味菇多肽总抗氧化能力的研究.doc

摘要:蟹味菇富含多种维生素以及氨基酸，特别是赖氨酸和精氨酸含量不低，因此蟹味菇的活性多肽具备很丰富的营养价值，能够益智增高，减少胆固醇，还能够延缓衰老，起到美容的效果。本文研究了蟹味菇多肽的最佳提取工艺和该肽的抗氧化活性，目的是为了促进蟹味菇活性肽的研究与开发，使其得到更好的利用。

首先从干货蟹味菇中提取蟹味菇蛋白，然后用中性蛋白酶酶解蟹味菇蛋白，得到相应的活性多肽，整个过程利用单因素和正交相结合的实验方法，得到制备蟹味菇蛋白和用中性蛋白酶酶解该产物的最优实验条件，并检测了该产物的抗氧化活性，最终获得了以下结果。蛋白质提取的最优条件是：液料比12mL/g，温度35℃，时间35min，pH值9，在此条件下蛋白的提取率为10.69%；中性蛋白酶酶解的最佳条件为：酶浓度5%、pH值7、酶解温度50℃，此时水解度为27.02%。从抗氧化实验中得出蟹味菇活性肽具有有效地清除OH自由基和氧自由基的能力，并且其效果和浓度之间有显著地的量效关系。

关键词  蟹味菇；制备；多肽；抗氧化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 蟹味菇简介-1

1.1.1 基础知识-1

1.1.2 蟹味菇特性和营养价值-1

1.2 蛋白质的提取方法-1

1.2.1 碱提酸沉法-1

1.2.2 TCA-丙酮沉淀法-1

1.2.3 反胶团萃取法-2

1.2.4 醇洗法-2

1.3 蛋白肽的制备方法-2

1.3.1 溶剂提取法-2

1.3.2 酶法-2

1.3.3 微生物发酵法-3

1.3.4 膜法分离技术-3

1.3.5 固相合成法-3

1.3.6 利用重组DNA技术合成活性肽-3

1.4 抗氧化性测定方法-3

1.4.1 FRAP法-3

1.4.2 ORAC法-4

1.4.3 TRAP法-4

1.4.4 PCL法-4

1.4.5 ABTS法-4

1.4.6 DPPH法-4

1.4.7 羟基自由基法-4

1.5 本课题的研究意义及主要研究内容-5

2 材料与方法-6

2.1 原料与试剂-6

2.2 仪器与设备-6

2.3 方法-6

2.3.1 蟹味菇蛋白提取-6

2.3.2 蟹味菇蛋白酶解-7

2.3.3 蟹味菇活性肽抗氧化能力研究-8

3 结果与分析-9

3.1 蟹味菇蛋白提取-9

3.1.1 单因素试验-9

3.1.2 蛋白质提取正交试验-11

3.2 蟹味菇蛋白酶解-11

3.2.1 单因素试验-11

3.2.2 中性蛋白酶水解正交试验-14

3.3 蟹味菇蛋白肽抗氧化研究-14

3.3.1 ORAC法测定蟹味菇活性肽抗氧化能力-14

3.3.2 蟹味菇活性肽清除羟基自由基能力测定-16

结论-18

致谢-19

参考文献-20