重氮化法合成盐酸克伦特罗人工抗原及免疫活性的研究.doc

摘要:本实验根据盐酸克伦特罗的理化性质，采用重氮化法将盐酸克伦特罗小分子与大分子载体蛋白BSA、OVA偶联，合成了人工抗原CL-BSA、CL-OVA。使用紫外分光光度计在波长为250nm-350nm处对CL、大分子蛋白BSA、OVA、偶联物CL-BSA、CL-OVA进行扫描，结果发现偶联物峰值发生明显偏移，人工抗原偶联成功。采用SDS-PAGE凝胶电泳法对偶联物进行鉴定，结果发现偶联物的分子量明显比载体蛋白的分子量大，再一次印证人工抗原合成成功。用偶联物CL-BSA对小鼠进行免疫，两周后断尾取血，使用CL-OVA做包被抗原，用间接ELISA法检测血清效价。三次免疫后的最高效价均可以达到1：6400，证明小鼠产生了针对盐酸克伦特罗的抗体，偶联物CL-BSA具有良好的免疫活性，盐酸克伦特罗人工抗原制备成功。

关键词：盐酸克伦特罗；人工抗原；紫外检测法；酶联免疫吸附技术

目录

摘要

Abstract

1绪论-1

1.1盐酸克伦特罗的简介-1

1.2盐酸克伦特罗的性质和作用原理-1

1.3盐酸克伦特罗残留对人和动物的危害-2

1.4盐酸克伦特罗的中毒事件-2

1.5常见的检测方法-3

1.5.1生物效应测定法-3

1.5.2理化检测法-3

1.5.3免疫学检测法-3

1.5.4生物传感器检测法-4

1.6酶联免疫吸附分析法-4

1.6.1酶联免疫吸附分析法的基本原理-4

1.6.2酶联免疫吸附分析法在兽药残留检测当中的应用-4

1.7本文研究的主要目的-4

2实验材料和方法-6

2.1实验材料-6

2.1.1实验器材-6

2.1.2主要试剂-6

2.2实验方法-9

2.2.1盐酸克伦特罗人工抗原合成的方法-9

2.2.2紫外扫描分析-9

2.2.3凝胶电泳法鉴定人工抗原合成结果-10

2.2.4间接酶联免疫分析法实验步骤-10

3结果与分析-11

3.1盐酸克伦特罗与载体的偶联-11

3.2紫外扫描结果-11

3.3 凝胶电泳法鉴定结果-13

3.4血清效价测定-14

结论-16

致谢-17

参考文献-18