银杏叶多糖提取、分离纯化及组成分分析.doc

摘要:实验采用酶法（酸性纤维素酶）提取银杏叶多糖。通过苯酚-硫酸法测定银杏叶多糖含量，研究加酶量、提取时间、提取温度对多糖得率的影响，同时利用Box-Behnken试

验优化提取工艺参数，用Sevag法对银杏叶粗多糖进行分离纯化，并通过薄层层析对银杏叶多糖组成分进行研究。实验结果表明:最佳提取条件为加酶量2.0%，提取时间80 min，提取温度55 ℃，此条件下多糖得率为11.05%；三个单因素对银杏叶多糖得率的影响程度为：提取时间>提取温度>加酶量；用Sevag法分离纯化粗多糖后，多糖纯度提高了48.69%；通过薄层层析确定硫酸为最佳水解酸，正丁醇：甲醇：氯仿：冰乙酸：水 = 50:18:20:6:6为最佳展层系统，银杏叶多糖组成分为葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-阿拉伯糖、L-鼠李糖。

关键词银杏叶多糖；提取；响应曲面；分离纯化；薄层层析

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

 1.1 银杏叶概况-1

1.1.1 银杏的简介及我国的银杏叶资源-1

1.1.2 银杏叶的药用价值-1

 1.2 植物多糖的研究现状-2

1.2.1 植物多糖的概念-2

1.2.2 植物多糖的分类-2

1.2.3 植物多糖的生物活性功能-2

1.2.4 植物多糖常用的提取方法-3

1.2.5 植物多糖常用的分离纯化方法-3

1.2.6 植物多糖常用的组成分分析方法-4

 1.3 研究意义及内容-5

1.3.1 研究意义-5

1.3.2 研究内容-5

2 材料与方法-6

 2.1 实验材料与试剂-6

 2.2 实验仪器-6

 2.3 实验方法-6

2.3.1 银杏叶的预处理步骤-6

2.3.2 银杏叶多糖的提取方法-6

2.3.3 测定银杏叶中多糖含量-7

2.3.4 标准曲线制作-7

2.3.5 单因素试验-8

2.3.6 响应曲面优化试验设计-8

2.3.7 银杏叶粗多糖的提取-9

2.3.8 银杏叶粗多糖的纯化-9

2.3.9 薄层层析法分析银杏叶多糖的单糖组成-10

3 结果与分析-12

 3.1 单因素试验条件选择-12

3.1.1 酸性纤维素酶加酶量对银杏叶多糖得率的影响-12

3.1.2 提取时间对银杏叶多糖得率的影响-12

3.1.3 提取温度对银杏叶多糖得率的影响-13

 3.2 响应曲面优化试验-14

3.2.1 优化试验-14

3.2.2 响应曲面分析及交互作用-15

3.2.3 最佳条件优化及验证结果-17

 3.3 银杏叶多糖脱蛋白前后的纯度-17

 3.4 银杏叶多糖组成分分析-17

3.4.1 水解酸的选择-17

3.4.2 展层系统的选择-19

3.4.3 展层系统的综合比较-21

结论-22

致谢-23

参考文献-24

附录-26