生姜多糖提取、分离纯化及组成分分析.doc

摘要:本实验以生姜为原料，利用酶提法研究加酶量、酶解时间、料液比对生姜多糖得率的影响，通过分析响应曲面并优化提取工艺参数，采用Sevag法对生姜多糖纯化，并对其组成成分进行分析。实验结果表明，加酶量、酶解时间、料液比三个因素对生姜得率的影响大小依次为酶解时间 ＞ 料液比 ＞ 加酶量；最佳工艺条件为料液比1 : 30、酶解时间80 min、加酶量3 %，此时多糖得率为15.13 %；生姜粗多糖的纯度为50.11 %，经脱蛋白后，生姜多糖纯度提高了40.15 %，多糖的纯度达到了70.23 %；通过薄层色谱法，确定了最佳水解酸为浓硫酸，最佳展层系统为水、醋酸、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯按6 : 7 : 12 : 7 : 20，生姜多糖是由D-半乳糖、D-甘露糖、果糖和葡萄糖组成的。

关键词生姜；纤维素酶；多糖；分离纯化；响应曲面；薄层层析

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

 1.1生姜概况-1

1.1.1生姜的简介-1

1.1.2生姜的营养学价值-1

1.1.3生姜的药用学价值-1

 1.2多糖的研究进展-1

1.2.1植物多糖的定义-1

1.2.2植物多糖的分类-2

1.2.3多糖的功能-2

 1.2.3.1免疫调节能力-2

 1.2.3.2抗氧化能力-2

 1.2.3.4抗肿瘤作用-2

 1.2.3.5降血糖能力-2

 1.2.3.6其他作用-3

1.2.4提取常用方法-3

 1.2.4.1酶解法-3

 1.2.4.2超声水提法-3

 1.2.4.3 溶剂提取法-3

1.2.5 植物多糖的分离纯化-3

 1.2.5.1 三维积法(Sevag)法-3

 1.2.5.2 三氟三氯乙烷法-3

 1.2.5.3 三氯醋酸法-4

 1.2.5.4 生物大分子纯化-4

1.2.6.分析植物多糖常用方法-4

 1.2.6.1薄层层析-4

 1.2.6.2高效液相色谱法-4

 1.2.6.3气相色谱法-4

 1.3研究意义及主要内容-4

1.3.1研究的意义-4

1.3.2实验内容梗概-5

2 原料和方法-6

 2.1实验原料、仪器-6

 2.2实验仪器设备-6

 2.3实验步骤-6

2.3.1生姜样品的预先处理步骤-6

2.3.2生姜多糖的提取方法-6

 2.3.2.1工艺的制作步骤-6

 2.3.2.2操作过程中重要步骤-6

2.3.3测定生姜当中所含多糖的含量-7

2.3.4标准曲线的绘制-7

 2.3.4.1葡萄糖标准溶液配制的方法-7

 2.3.4.2 苯酚溶液的配制-7

 2.3.4.3标准曲线的绘制-7

2.3.5 单因素实验设计方案-8

2.3.6响应曲面优化试验设计-8

2.3.7 酸性纤维素酶提取生姜多糖优化试验步骤-9

 2.3.7.1提取生姜粗多糖的工艺制作过程-9

 2.3.7.3 计算生姜粗多糖得率的公式-9

2.3.8 生姜多糖的纯化-9

 2.3.8.1Sevag法脱蛋白质的工艺流程-9

 2.3.8.2 脱蛋白过程中的重要点-9

2.3.9 薄层色谱法测定生姜多糖-10

 2.3.9.1 操作过程-10

 2.3.9.2 水解酸的选择-10

 2.3.9.3 展层系统的配制-10

 2.3.9.4 成分分析过程当中的重要点-10

3 结果与分析-12

 3.1单因素试验条件的选择-12

3.1.1加酶量对生姜多糖得率的影响-12

3.1.2 酶解时间对生姜多糖得率的影响-12

3.1.3 料液比对生姜多糖得率的影响-13

 3.2响应曲面优化试验-14

3.2.1优化实验数据处理与分析-14

3.2.3 最佳条件优化及其验证结果-17

 3.3生姜多糖脱蛋白前后的纯度-17

 3.4 生姜精多糖组成成分分析-18

3.4.1 水解酸的选择-18

3.4.2展层系统的选择-18

3.4.3展层系统综合比较-21

结论-22

致谢-23

参考文献-24