牛蒡多糖的制备及抗氧化活性研究.doc

摘要:用果胶酶酶解牛蒡样品提取了牛蒡多糖，通过单因素实验研究了酶解法提取牛蒡多糖的工艺条件，通过响应面实验得出最佳提取条件，运用sevage法对多糖进行除蛋白的提纯，并通过硫酸苯酚法测定了多糖的纯度。由实验最终结果看出，三种因素的最佳值为：料液比1:26，反应时间67min，加酶量为1.0%。牛蒡粗多糖的纯度为48.20%，经过了sevage法除蛋白后，牛蒡精多糖的纯度为70.27%，提纯后纯度提高了45.79%。牛蒡多糖和纯品多糖对·O2-、·OH清除能力属于较强的一类。精多糖对·OH的清除率可达到65.94%，对·O2-清除率可达50.19%；粗多糖对对·OH的清除率可达到56.28%，对·O2-清除率可达41.22%。对DPPH和亚硝根的清除能力较弱，精多糖清除DPPH的比率达到46.77%，清除NO2-的比率达到49.02%；粗多糖清除DPPH的比率仅仅只有39.27%，清除NO2-的比率更是只有45.81%。牛蒡多糖清除四种自由基的能力均低于VC。

关键词 牛蒡；多糖；提取工艺；酶法；抗氧化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 牛蒡-1

1.1.1 牛蒡简介-1

1.1.2 牛蒡的食用和营养价值-1

1.1.3 牛蒡的药用价值-1

1.2 多糖研究概况-1

1.2.1 多糖的定义-1

1.2.2 多糖的分类-2

1.2.3 多糖的功能-2

1.2.3.1 抗氧化和清除自由基的作用-2

1.2.3.2 多糖的免疫调节功能-2

1.2.3.3 多糖的降血糖功能-2

1.2.3.4 多糖的抗病毒功能-2

1.2.3.5 多糖的抗辐射功能-2

1.3 多糖的提取方法-3

1.3.1 溶剂提取法-3

1.3.2 酶解法-3

1.3.3 物理强化法-3

1.4 多糖常用纯化方法-3

1.4.1 sevage法-3

1.4.2 三氟三氯乙烷法-3

1.4.3 三氯醋酸法-4

1.5 研究意义及主要内容-4

1.5.1 研究意义-4

1.5.2 实验主要内容-4

2 材料与方法-5

2.1 实验材料与试剂-5

2.2 实验仪器与设备-5

2.3 实验方法-6

2.3.1 牛蒡粉的制备-6

2.3.2 酶解法提取牛蒡中的可溶性多糖-6

2.3.2.1 工艺流程-6

2.3.2.2 操作要点-6

2.3.3 牛蒡多糖含量的测定-6

2.3.4 葡萄糖标准曲线的绘制-7

2.3.4.1 葡萄糖标准溶液的配置-7

2.3.4.2 苯酚溶液的配制-7

2.3.4.3 标准曲线的绘制-7

2.3.5 单因素实验-8

2.3.6 相应曲面试验设计-8

2.3.7 牛蒡多糖的提取率的计算-8

2.3.7.1 牛蒡多糖提取工艺-8

2.3.7.2 牛蒡多糖提取的操作-8

2.3.7.3 牛蒡多糖提取率的计算-9

2.3.8 sevag法脱除蛋白质-9

2.3.8.1 sevag法除蛋白的工艺流程-9

2.3.8.2 操作要点-9

2.3.8.3 牛蒡多糖纯度计算-9

2.3.9 牛蒡中多糖清除自由基实验-9

2.3.9.1 ·OH自由基清除率的测定-9

2.3.9.2 ·O2-自由基清除率的测定-10

2.3.9.3 DPPH清除率的测定-10

2.3.9.4 NO2-清除率的测定-11

3 结果与讨论-12

3.1 酶法提取牛蒡中多糖工艺条件的选择-12

3.1.1 料液比对牛蒡多糖提取率的影响-12

3.1.2 加酶量对牛蒡多糖提取率的影响-12

3.1.3 反应时间对牛蒡多糖提取率的影响-13

3.2 酶法提取牛蒡多糖工艺条件优化-14

3.2.1 优化实验-14

3.2.2 响应面分析和交互影响-16

3.2.3 最佳反应条件及验证-17

3.3 牛蒡多糖的纯度-17

3.4 牛蒡多糖对自由基的清除效果-17

3.4.1 牛蒡多糖和VC对·OH的清除效果-18

3.4.2 牛蒡多糖和VC对·O2-的清除效果-18

3.4.3 牛蒡多糖和VC对DPPH的清除效果-19

3.4.4 牛蒡多糖和VC对NO2-的清除效果-20

结论-22

致谢-23

参考文献-24