糖苷酶抑制剂的快速筛选体系优化.doc

摘要:随着我国社会渐趋老龄化，糖尿病发病率也逐年升高。而作为辅助治疗糖尿病的主要药物，α-糖苷酶抑制剂有着能有效降低餐后血糖的作用。目前，人们在近百种天然物中发现了具有抑制α-糖苷酶活性的成分，然而现有的筛选糖苷酶抑制剂的体系仍有缺陷。

本文主要研究了葡萄糖微孔板法和PNPG微孔板法两种快速筛选体系，通过单因素实验和正交实验，优化了两种筛选体系的反应条件，比较了两种体系的优劣，并分别用两个体系对从7种不同的原料中的乙醇提取物进行筛选。结果显示，葡萄糖微孔板法的最适反应条件是蔗糖底物浓度0.25g/L，反应温度40℃，反应时间25min。PNPG微孔板法在底物浓度为0.25mmol/L，反应温度40℃，反应时间25min的条件下酶活最高。最后验证得到牛蒡皮和牛蒡肉的乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用较大。

关键词 葡萄糖微孔板法；PNPG微孔板法；筛选体系

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 糖尿病概述-1

1.1.1 糖尿病的概念-1

1.1.2 糖尿病的诊断标准-1

1.1.3 糖尿病的类型-1

1.2 糖尿病的药物治疗及研究进展-1

1.2.1 胰岛素-1

1.2.2 口服降血糖药-2

1.2.3 中草药药物-2

1.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂概述-2

1.3.1 α-葡萄糖苷酶-2

1.3.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂的来源-2

1.3.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂的作用机制-3

1.4 α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的研究进展-3

1.4.1 酶-抑制剂模型（体外筛选模型）-4

1.4.2 高血糖动物模型（体内筛选模型）-4

1.4.3 其他筛选模型-5

1.5 本课题的研究意义及主要内容-5

1.5.1 研究意义-5

1.5.2 研究的主要内容-5

2 材料与方法-6

2.1 材料-6

2.1.1 原料-6

2.1.2 试剂-6

2.1.3 仪器-6

2.2 方法-6

2.2.1 小鼠制备空肠匀浆（含α-葡萄糖苷酶）-7

2.2.2 各原料活性部位的提取-7

2.2.3 葡萄糖微孔板法快速筛选平台体系优化-7

2.2.4 PNPG微孔板法快速筛选平台体系优化-8

3 结果与分析-10

3.1 葡萄糖微孔板法快速筛选平台体系-10

3.1.1 葡萄糖标准曲线-10

3.1.2 单因素实验-10

3.1.3 葡萄糖微孔板法正交试验-12

3.1.4 葡萄糖微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的验证-12

3.1.5 葡萄糖微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的应用-13

3.2 PNPG微孔板法快速筛选平台体系-13

3.2.1 PNP标准曲线-13

3.2.2 单因素实验-13

3.2.3 PNPG微孔板法正交试验-15

3.2.4 PNPG微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的验证-16

3.2.5 PNPG微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的应用-16

结论-17

致谢-18

参考文献-19