聚乙二醇-缓冲盐双水相萃取生姜蛋白酶的研究.doc

摘要:以鲜姜为原料，以机械打碎制成浆液，通过冷冻离心获得生姜汁上清液，采用聚乙二醇-硫酸铵双水相法从生姜汁中萃取生姜蛋白酶，通过单因素和正交试验确定最佳萃取条件，并对冷冻干燥后的生姜蛋白酶的酶学性质进行测定分析。研究结果表明，双水相法萃取生姜蛋白酶的最佳条件为：相对分子质量为4000的聚乙二醇的质量分数20%，硫酸铵质量分数15%，pH6.5，温度50℃。酶学性质研究表明：该酶的最适温度为60℃，最适pH为6.0，等电点为pH4.0；在pH为7.0时，该酶的稳定性最好；当环境温度较于30℃，酶的稳定性较好。

关键词 生姜蛋白酶；提取；双水相萃取；酶学性质

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 生姜蛋白酶的研究概况-1

1.2 蛋白酶的提取纯化研究进展-1

1.3 双水相提取蛋白酶的研究进展-2

1.4 研究生姜蛋白酶的意义-3

1.5 本课题研究的内容-4

2 材料与方法-5

2.1 实验材料与设备-5

2.1.1 实验材料-5

2.1.2 实验试剂-5

2.1.3 主要仪器-5

2.2 实验方法和步骤-5

2.2.1 提取生姜蛋白酶-5

2.2.2 蛋白质含量的测定-6

2.2.3 蛋白酶活力的测定-7

2.2.4 单因素实验-7

2.2.5 正交实验-8

2.2.6 冷冻干燥-8

2.2.7 生姜蛋白酶酶学性质的研究-8

3 结果与讨论-10

3.1 生姜蛋白酶提取最佳工艺条件的研究-10

3.1.1 考马斯亮蓝测定蛋白质含量标准曲线的绘制-10

3.1.2 酶活力标准曲线的绘制-10

3.1.3 单因素结果分析-11

3.2 正交实验结果-15

3.3 酶学性质分析-16

3.3.1 生姜蛋白酶最适pH的确定-16

3.3.2 生姜蛋白酶pH稳定性的确定-16

3.3.3 生姜蛋白酶最适温度的确定-17

3.3.4 生姜蛋白酶温度稳定性的确定-18

3.3.5 生姜蛋白酶等电点的确定-18

结论-19

致谢-20

参考文献-21