蝉花虫草孢子粉高产新技术研究.doc

摘要:本实验研究蝉花孢子粉高产新技术，是对蝉拟青霉菌株在人工条件下仿照白僵菌孢子粉生产工艺进行培养。先对蝉花孢子粉培养的温度、每日光照时间、料液比进行单因素实验，选出相对最佳条件，再进行正交试验，确定最佳培养条件。并对传统单一培养基进行改进，以米糠、麸皮、玉米粉、豆粕粉进行混合使用，用正交试验的方法，以孢子粉数量为参考，探索最佳混合比。最后对孢子粉进行活性检测。经实验得出：（1）以米糠、麸皮、玉米粉、豆粕粉培养基，对温度、料液比、每日光照时间先进行单因素实验后进行正交试验得出料液比对产量的影响最大，然后是温度，最后是每日光照时间，得到最佳条件料液比为1:1.2，温度为20℃，每日光照时间为10h，再此条件下的孢子粉产量为1.61×1011cfu。（2）对玉米粉、米糠、豆粕粉、麸皮的加入量进行四因素四水平正交试验，得到玉米粉对产量影响最大，然后是麸皮，其次是米糠，最后是豆粕粉，并得到最佳加入量为玉米粉的加入量15g，米糠的加入量为5g，豆粕粉的加入量为5g，麸皮的加入量10g，在此条件下孢子粉产量为2.18×1011cfu，而传统生产工艺产量只有1.73×1011cfu。（3）对所得到的蝉花孢子粉进行活性检验，多糖用苯酚硫酸法测量，抗氧化性采用DPPH自由基清除法，抑菌活性测量用牛津杯法，得到孢子粉多糖含量为8.88%；3.99mg/mL蝉花孢子粉多糖溶液对含有0.2 mmol/L DPPH的自由基消除率为48.87%；蝉花孢子粉多糖对大肠杆菌有抑菌活性，测量得到抑菌圈大小为13.5mm。

关键词 蝉花孢子粉；生产工艺；生物活性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 蝉花孢子粉的研究进展-1

1.1.1 蝉花孢子粉的化学组成-1

1.1.2 蝉花孢子粉的药理活性分析-2

1.2 蝉花孢子粉的培养方法-4

1.2.1 传统孢子粉的培养方法-4

1.2.2 新型蝉花孢子粉生产技术-4

1.3 研究意义及主要内容-5

2 材料与方法-6

2.1 供试菌种-6

2.2化学试剂-6

2.3实验仪器-6

2.4培养基-7

2.5 工艺优化设计-7

2.5.1 培养条件研究-7

2.5.2培养基成分正交设计-7

2.6 实验与方法-8

2.6.1菌种活化-8

2.6.2 血球计数法-8

2.6.3多糖的提取和测定-8

2.6.4 蝉花孢子粉抗氧化性检测-9

2.7 抑菌实验-9

3 结果与分析-10

3.1 高产新工艺研究-10

3.1.1培养条件优化设计结果-10

3.1.2 培养条件正交试验-11

3.1.3 培养基成分优化设计结果-12

3.2 孢子粉活性分析-14

3.2.1孢子粉多糖含量和抗氧化活性分析-14

3.2.2 孢子粉抑菌活性分析-15

结论-16

致谢-17

参考文献-18