不同交配型基因对蛹虫草子实体发育的影响.doc

摘要:为了研究不同交配型基因对蛹虫草子实体发育的影响，本文通过对蛹虫草原始菌株进行单孢菌株的分离得到无性分生孢子，并且对分离得到的孢子进行交配型基因的鉴定，区分得到不同交配型基因的菌株，以单交配型和混合交配型分别接种诱发子实体，初步了解了不同交配型基因对其子实体发育的影响。经实验发现：（1）分离获得32个单孢子，经鉴定蛹虫草单孢株的交配型基因仅有MAT1-1和MAT1-2两种，其中MAT1-1型20株，MAT1-2型12株；（2）将分离得到的单孢株进行单独和配对接种培养，只有MAT1-1和MAT1-2单孢分离株配对培养的能形成子实体，MAT1-1与MAT1-2单独培养的均不能形成子实体；（3）通过对MAT1-1和MAT1-2配对培养的蛹虫草粗多糖的提取及对提取的粗多糖清除DPPH自由基能力与还原力的测定得出粗多糖质量分数为7%±0.8%，在0.1-4 g/L内，粗多糖对DPPH的清除能力与浓度成正比，在0-0.4g/L内，粗多糖的还原力与质量浓度成正比。

关键词蛹虫草；交配型；子实体

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1蛹虫草概述-1

1.1.1蛹虫草的简介-1

1.1.2蛹虫草的活性成分与功能研究-1

1.1.3蛹虫草的人工培养-2

1.2子囊交配型的研究进展-3

1.3单孢分离技术-3

1.4课题研究目的及意义-4

2材料及方法-5

2.1供试菌种-5

2.2化学试剂-5

2.4.1固体斜面培养基（PPDA）的配制-6

2.4.2水琼脂的配制-6

2.4.3液体摇瓶培养基（PPDA）的配制-6

2.4.4大米培养基的配制-6

2.5实验方法-6

2.5.1菌种的活化-6

2.5.2单孢菌株分离-6

2.5.3 PCR扩增蛹虫草单孢株交配型基因-7

2.5.4琼脂糖电泳检测-8

2.5.6蛹虫草子实体粗多糖的提取与活性检测-10

3结果与分析-11

3.1蛹虫草单孢子的分离-11

3.2单孢菌株基因型鉴定结果-11

3.3不同交配型混合的蛹虫草及单交配型蛹虫草子实体诱发情况-12

3.4放大栽培验证结果-13

3.5蛹虫草子实体多糖提取与活性检测结果-14

3.5.1多糖含量-14

3.5.2清除PPDH自由基的能力-14

3.5.3还原力-15

结论-16

致谢-17

参考文献-18