阿魏酸酯酶对农作物秸秆降解特性研究.doc

摘要:本课题以阿魏酸酯酶为样品，通过阿魏酸酯酶对农作物秸秆的降解特性的研究，分析和总结了阿魏酸酯酶在各种不同条件下降解麸皮的功效，以期为进一步研究阿魏酸酯酶的价值提供了实践应用指导依据。实验的步骤大体可以分为五个部分，从一开始的培养基的制备，到阿魏酸酯酶的培养，再到阿魏酸酯酶的分离和阿魏酸酯酶的纯化，最后进行阿魏酸酯酶的理化性质研究。

实验研究以0.1g麸皮为降解对象。首先进行阿魏酸酯酶液体培养基的配制，将活化后的霉菌接种到培养皿中进行培养；再进行阿魏酸酯酶固体培养基的配制，将培养皿中的菌液倒入固体培养基中进行培养；分离纯化通过离心机分离，加硫酸铵盐析，用透析袋进行透析；阿魏酸酯酶降解麸皮生成还原糖，通过分光光度计测不同条件下还原糖含量，进行对比试验。

反应之后，得到了阿魏酸酯酶最适反应温度为50℃，最适反应酶量为400μg,最适反应时间为5h,最适反应金属离子为Na﹢，最适反应PH为5。

关键词 培养基；离心；盐析；透析；吸光度

目录

摘要

Abstract

1绪论-1

1.1农作物秸秆的处理方法-1

1.1.1秸秆的物理处理方法-1

1.1.2 秸秆的化学处理方法-1

1.1.3秸秆生物处理法-2

1.2 阿魏酸酯酶-3

1.2.1 阿魏酸酯酶的介绍-3

1.3 本课题的研究背景和研究意义-4

1.3.1 研究背景-4

1.3.2 研究意义-4

2 材料与方法-5

2.1原料与试剂-5

2.2 仪器与设备-5

2.3阿魏酸酯酶粗酶液提取方法-5

2.3.1活化培养-6

2.3.2霉菌酶活检测-6

2.3.3菌液制作-6

2.3.4发酵培养-6

2.4阿魏酸酯酶的分离纯化-7

2.4.1硫酸铵分级沉淀-7

2.4.2透析-7

2.5 阿魏酸酯酶对农作物秸秆降解特性的研究-8

2.5.1阿魏酸酯酶活性的测定方法-8

2.5.2阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应温度-8

2.5.3阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应时间-8

2.5.4阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应pH-8

2.5.5阿魏酸酯酶降解秸秆的最适金属离子-8

2.5.6 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适酶量-9

3结果与分析-10

3.1阿魏酸酯酶的制备-10

3.1.1阿魏酸酯酶的提取-10

3.1.2阿魏酸酯酶的分离-10

3.2阿魏酸酯酶的特性分析-11

3.2.1阿魏酸酯酶酶活性的测定-11

3.2.2阿魏酸酯酶降解秸秆最适反应温度-12

3.2.3阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应时间-12

3.2.4 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适反应pH-13

3.2.5阿魏酸酯酶降解秸秆的最适金属离子-14

3.2.6 阿魏酸酯酶降解秸秆的最适酶量-15

结论-16

致谢-17

参考文献-18