鸡新城疫卵黄抗体的分离纯化及鉴定.doc

摘要：采用水溶稀释法结合硫酸铵无机物沉淀法分离纯化鸡卵黄中IgY, 实验中通过比较不同浓度的饱和硫酸铵对分离纯化的影响。并采用SDS-PAGE法和考马斯亮蓝法对提取产物进行检测。结果显示， 饱和度为50%的硫酸铵分离纯化效果最优，IgY得率最高。

关键词：IgY，分离纯化,鉴定

Abstract: Dilution with water-soluble ammonium sulfate mineral precipitation in the separation and purification of egg yolk IgY, Experiment by comparing the effect of different concentration of saturated ammonium sulfate on separation and purification. And extraction using Coomassie brilliant blue method and the SDS-PAGE method on the examination product identification. Results show that joined 50% optimal separation and purification effect of saturated ammonium sulfate, IgY had the highest rate of.

Keywords: IgY, Separation and purification，Identification

近年来，已有很多口服特异性IgY替代抗生素成功治疗胃肠疾病的报道，并有许多学者及生物制品公司都在着手于IgY制备，纯化的研究工作。目前在卵黄抗体的形成、生物学特性等方面已研究得比较清楚，并且以卵黄抗体作为诊断试剂和防治药物的研究愈来愈受到关注。多年来，已建立了许多较为高效而经济的方法，这些方法大多以PEG、硫酸葡聚糖、天然胶，如藻酸钠、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白质。1980年，Polson首先提出聚乙二醇(PEG)两步沉淀法，1981年Jensensius等提出了硫酸葡聚糖沉淀法(DS法)，1992年Akita等用水稀释法(WD)提纯卵黄抗体，每个卵黄可获得100mg以上的卵黄抗体。WD法产量最高，其次为DS法，WD法更适合大规模生产。本文利用水稀释法初步分离卵黄抗体，再用硫酸铵沉淀法提取，接着透析纯化卵黄抗体，并进一步对其鉴定。