条纹斑竹鲨BAFF基因的体外表达及生物学活性鉴定.doc

摘要：本实验中，将条纹斑竹鲨CpBAFF的胞外可溶性片段与pET43.1a(+)表达载体连接形成重组质粒，在E. coliBL21表达菌株中表达出含有NusA-His6标签的重组蛋白。SDS-PAGE检测此蛋白质为83 KD，体外MTT实验表明，经镍柱-亲和层析纯化后的重组CpBAFF蛋白能和anti-IgM共同促进小鼠脾脏淋巴细胞的存活,即得到的纯化的CpsBAFF蛋白是具有生物学活性的。

关键词：条纹斑竹鲨（Chiloscyllium plagiosum）  B 淋巴细胞刺激因子  体外表达 淋巴细胞增殖

Abstract：In this experiment, the striped shark CpBAFF owner soluble extracellular fragment and pET43.1a (+) expression vector to form recombinant plasmid, expressed in the BL21 expression strain to contain NusA-His6 tag of the recombinant protein.By SDS-PAGE detect this protein was 83KD, in vitro MTT experiments show that, after nickel column - affinity chromatography purified recombinant CpBAFF protein and anti-IgM together can promote the survival of mouse spleen lymphocytes.

Key words: stripe spot bamboo shark( Chiloscyllium plagiosum), B lymphocytes stimulating factor, In vitro expression, lymphopoiesis

鲨鱼是海洋中种类不多，却富含有经济价值的一个类群。鲨鱼肉营养丰富，含高蛋白，不饱和脂肪酸和多种矿物质[8-9]。鲨鱼的富含有多种维生素和DNA,EPA等高度不饱和脂肪酸。鲨鱼的体内还含有多种活性物质，其中包括生理活性物质, 其中包括目前国内外争相研究的抗肿瘤活性成分[10-12]。本实验中为了研究软骨鱼类 BLyS 的功能和作用机制，我们把条纹斑竹鲨CpBAFF的胞外可溶性片段在大肠杆菌体内得以表达，纯化，纯化的目的蛋白对小鼠脾脏淋巴细胞体外增值实验证实，制备的sBLyS具有刺激B细胞的生物学活性，即其表达蛋白有生物学活性。