液泡膜焦磷酸酶基因转化烟草的研究.doc

摘要：采用常规分子克隆技术，利用pMD18-T载体，成功地将SaVP1基因构建到植物表达载体pCAMBIA1301中，并通过冻融法将该重组质粒成功地导入根癌农杆菌菌株LBA4404中。通过叶片共培养法转化烟草，在含有卡那霉素的MS固体培养基上已筛选出具有潮霉素抗性的转化苗。

关键词：烟草； SaVP1； 转化；根癌农杆菌

目录

摘要

Abstract

1.引言-6

1.1液泡膜H+-PPase的特性及结构-7

1.2液泡膜H+-PPase 的主要功能-7

1.2.1质子泵-7

1.2.2 抗氧胁迫和冷胁迫-7

1.2.3 参与K+运输-8

1.2.4 参与蔗糖的合成-8

1.2.5 参与生长素的运输-9

2.材料与方法-9

2.1试验材料-9

2.1.1植物材料-9

2.1.2菌株-9

2.1.3试剂-9

2.1.4抗生素-9

2.1.5引物-9

2.1.6培养基-10

2.2试验方法-10

2.2.1植物表达载体pCAMBIA1301-SaVP1的构建-10

2.2.2重组体pCAMBIA1301-SaVP1转化根瘤农杆菌-12

2.2.3叶盘法转化烟草-13

3.结果与分析-14

3.1.植物表达载体pCAMBIA1301-SaVP1的构建-14

3.2叶盘法转化烟草-16

3.2.1共培养-16

3.2.2诱导生芽-16

3.2.3诱导生根-16

3.2.4移栽-17

4.讨论-18

参考文献-19

附录-23

致谢-25