摘要:采用超滤、透析、离子交换层析(DEAE-C)、葡聚糖凝胶层析(sepharose G-75)以及DAEA-sepharose fast flow 的方法对克氏原螯虾虾肝中的蛋白质进行分离纯化实验。结果表明:超滤和透析只适合在粗分离时使用,并且超滤比透析所用时间短,适合大量物质分离;在细分离方面,DAEA-sepharose fast flow结合了离子交换层析和葡聚糖凝胶层析两种方法的优点,因此在细分离纯化方面状态下DAEA-sepharose fast flow分离纯化效果最佳、结果最好。
关键词:克氏原螯虾;虾肝;分离纯化;
目录
摘要
Abstract
引言-3
1实验器材-5
1.1实验样品-5
1.2 实验仪器-5
1.3 实验药品和试剂-5
1.4实验预处理-5
2 实验方法-5
2.1超滤-5
2.1.1试剂配制-5
2.1.2操作-6
2.2透析-7
2.2.1试剂配制-7
2.2.2实验原理示意图-7
2.2.3实验操作流程-7
2.3离子交换层析-8
2.3.1溶液配制-8
2.3.2实验原理示意图-9
2.3.3分子量在2~5万样品的离子交换层析-10
2.3.4分子量大于5万样品的离子交换层析-10
2.4葡聚糖凝胶G-75过滤层析-11
2.4.1试剂配制-11
2.4.2实验原理示意图-11
2.4.3实验步骤-12
2.5 DEAE-Sepharose Fast Flow-12
2.5.1试剂配制-12
2.5.2 DEAE-Sepharose Fast Flow操作-13
3实验结果与分析-13
3.1超滤与透析关于蛋白质分离纯化情况的之间的比较-13
3.2离子交换层析对克氏原螯虾虾肝中蛋白质分离情况的比较-14
3.3离子交换层析、葡聚糖凝胶层析、DEAE-Sepharose Fast Flow分离纯化情况的比较-17
4 讨论-19
致谢-19
参考文献-20