产重组内切葡聚糖酶工程菌的固定化分析.doc

摘要:本实验采用细胞固定化技术，用海藻酸钠和氯化钙固定E.coli工程菌，研究重组大肠杆菌富集的方法、固定化培养液的组成、海藻酸钠浓度和氯化钙浓度对固定重组大肠杆菌产纤维素酶酶活的影响。实验结果显示：海藻酸钠最适浓度为4.0%，氯化钙最适浓度为2.0%。结论表明：经4.0%海藻酸钠和2.0%氯化钙固定的大肠杆菌拥有良好的酶活性，可以多次使用，具有很高的经济价值。

关键字：大肠杆菌；固定化；海藻酸钠；氯化钙

目录

摘要

Abstract

1绪论-1

1.1 固定化技术-1

1.1.1 吸附法-1

1.1.2 交联法-2

1.1.3 共价结合法-2

1.1.4 包埋法-2

1.2影响包埋法的因素-2

1.2.1 海藻酸钠浓度-2

1.2.2 氯化钙的浓度-3

1.2.3 接种量-3

1.2.4 温度-3

1.2.5 PH值-3

1.3 固定化技术应用-3

1.3.1在环境保护方面的应用-3

1.3.2在食品工业方面的应用-4

1.3.3在医学医疗方面的应用-4

1.3.4在发酵工业方面的应用-4

1.4工程菌-5

1.4.1工程菌-5

1.5工程菌的构建方法-5

1.5.1原生质体融合技术-5

1.5.2质粒转移技术-5

1.5.3基因重组技术-5

1.6工程菌的应用-6

1.6.1在环境方面的应用-6

1.6.2在食品方面的应用-6

1.6.3在工业方面的应用-6

1.6.4在农业方面的应用-7

1.7本研究的目的与意义-7

2 实验材料和方法-8

2.1 实验试剂和仪器-8

2.1.1 实验材料-8

2.1.2 实验试剂-8

2.1.3 实验设备-9

2.2培养基的配制-9

2.2.1 LB固体培养基的配制-10

2.2.2 LB液体培养基的配制-10

2.2.3 培养基的高压蒸汽灭菌-10

2.3 实验方法-10

2.3.1 菌种的筛选和纯化-10

2.3.2 菌种的培养与保存-11

2.3.3 菌种的扩大培养-11

2.3.4固定化大肠杆菌的制备-11

2.3.5接种量对大肠杆菌细菌的影响-11

2.3.6大肠杆菌葡萄糖含量的测定—分光光度法-11

3 结果与讨论-12

3.1 实验结果-12

3.1.1 海藻酸钠浓度对固定化小球形态的影响-12

3.1.2 CaCl2浓度对固定化小球形态的影响-13

3.1.3 葡萄糖标准曲线的绘制-14

3.1.4 接种量对固定化大肠杆菌工程菌的影响-14

3.2分析和讨论-15

结论-17

致谢-18

参考文献-19