油茶、沙棘、文冠果和油用牡丹四种木本油料内参基因的筛选.docx

摘要:木本油料是提供优质食用油的重要来源。为实现同一基因在油茶、沙棘、文冠果和油用牡丹四种木本油料间的表达差异分析，本研究开展了对内参基因的挖掘、筛选及表达特性分析，并进一步探明了稳定候选基因在沙棘种子不同发育时期中的表达特性。主要研究成果如下：

（1）分析油茶、沙棘、文冠果和油用牡丹转录组数据库，筛选得到可用于种子表达分析的八个内参候选基因GAPDH、Actin、TUBULIN、RPL4、eEF1α、NADH、Ubiquilin和eIF4A。

（2）利用实时荧光定量PCR的方法查明了各基因在种子中的表达模式，Actin基因在四种木本油料中表达相对最稳定，Ubiquilin基因可作为沙棘、油茶和文冠果种子表达分析的内参候选基因。

（3）分析了Actin基因在沙棘“芬兰2号”不同组织和不同时期的表达特性，证明其可在沙棘四个不同生长发育时期的果肉及种子中稳定表达，适合实时定量实验中校正目的基因表达。

关键词：实时荧光定量PCR；木本油料；内参基因

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 课题背景-1

1.2 实时荧光定量PCR的简介-1

1.3 四种木本油料介绍-2

2 内参基因的筛选-4

2.1 材料与方法-4

2.1.1 植物材料-4

2.1.2 试剂及仪器-4

2.1.3 试验方法-4

2.2 内参基因的初选-6

2.2.1 引物设计-6

2.2.2 实时荧光定量PCR-8

2.2.3数据分析 -8

2.3 结果与讨论-8

2.3.1 四种木本油料Ct值比较-8

3沙棘不同发育阶段种子和果肉组织中内参基因Actin 验证-11

3.1 材料与方法-11

3.1.1 植物材料-11

3.1.2 试剂及仪器-11

3.1.3 试验方法-11

3.1.4 数据分析-11

3.2结果与讨论-11

结    论-14

参 考 文 献-15

附录四种木本油料内参基因溶解曲线-17

致    谢-19