牛磺酸对HepG2细胞胆固醇代谢的影响.doc

摘要:目的：本课题拟在细胞水平验证牛磺酸的降低胆固醇作用，进而为今后在分子水平深入研究牛磺酸降脂的作用机制打下基础。方法：体外培养人肝细胞HepG 2，采用MTT方法检测牛磺酸对HepG2细胞增殖状态的影响；利用氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）建立高胆固醇模型；利用油红O染色法，研究不同剂量的牛磺酸对高胆固醇HepG2细胞内脂质含量的影响，并初步建立和优化细胞内胆固醇检测方法。结果： MTT法结果显示细胞在浓度为低于30mM牛磺酸下，对细胞增殖影响无显著差异，对细胞无毒性作用；油红O染色结果显示，在83μg/mL浓度的ox-LDL下，细胞内脂质含量明显升高，高胆固醇模型初步建立；在5mM，10mM，25mM浓度的牛磺酸下，细胞内脂质含量较模型组有降低趋势。关于细胞内胆固醇浓度的测定，采用酶法测定游离胆固醇（FC）。结论：对肝细胞HepG2增殖无影响的牛磺酸浓度为小于30mM；83μg/mLox-LDL可诱导肝细胞高胆固醇模型，5mM，10mM，25mM浓度的牛磺酸对细胞内脂质含量有降低作用，初步建立了细胞内胆固醇浓度酶法测定方法。

关键词： 牛磺酸  胆固醇 HepG2细胞

目录

摘要

Abstract

引言

1.1高胆固醇血症-1

1.2牛磺酸的概况-1

1.3.牛磺酸降胆固醇作用-1

2 材料与方法-2

2.1细胞培养试剂-2

2.2油红O染色所需试剂-3

2.3 MTT比色试验所需试剂-3

2.4细胞内胆固醇测定试剂-3

2.5实验仪器-4

2.6 实验方法-5

2.6.1细胞培养-5

2.6.2牛磺酸浓度的筛选（MTT法）-5

2.6.3高胆固醇模型及分组-6

2.7油红O染色法-6

2.8细胞内胆固醇测定-6

2.9统计学分析-8

3 实验结果-8

3.1牛磺酸浓度的筛选-8

3.2高脂模型的建立-9

3.3牛磺酸对HepG2细胞脂质含量的影响-10

3.4细胞内胆固醇测定-10

结论

参考文献

致谢