麦幼苗苯丙氨酸解氨酶活性测定实验体系的构建.doc

摘要:目的：构建小麦苯丙氨酸解氨酶（PAL）的提取、纯化、活力测定的实验体系，并进一步利用该体系探讨干旱、盐胁迫和低温等非生物因子对PAL的影响。

方法：以小麦幼苗为材料，经冰浴研磨、硫酸铵分级沉淀，然后用紫外分光光度法测定苯丙氨酸解氨酶提取液活性。

结果：

三次重复，盐析后，酶提取液稀释一倍与未稀释相比，酶活力降低达差异显著（P<0.05）。盐析后比盐析前的酶活和比活力都升高且呈极显著差异（P<O.01）。饱和硫酸铵分级沉淀提纯倍数三次重复分别为2.9、1.7、4.9倍。

与正常组相比，干旱胁迫组，酶活力升高差异不显著，比活力降低且差异极显著（P<0.01）；盐胁迫胁组，酶活力升高且极显著差异（P<0.01）；低温胁迫组酶活力和比活力都升高且差异极显著（P<0.01）。

结论：

1.小麦幼苗苯丙氨酸解氨酶活性测定实验体系稳定，可作为教学实验用体系。

2.干旱、盐、低温胁迫下，对小麦幼苗苯丙氨酸解氨酶活性的影响有所不同。

关键词：小麦；苯丙氨酸解氨酶； 活性测定；逆境胁迫

目录

摘要

Abstract

引言

1 实验材料与方法-2

1.1实验材料-2

1.1.1实验试剂-2

1.1.2实验器材-2

1.2实验方法-2

1.2.1苯丙解氨酶的提取、纯化及活力测定体系的构建-2

1.2.1.1 酶液提取-2

1.2.1.2 酶粗提液的初步纯化-3

1.2.1.3苯丙解氨酶活性测定-3

1.2.1.4酶蛋白质含量测定-3

1.2.1.5数据处理-4

1.2.2逆境条件对小麦幼苗苯丙氨酸解氨酶的影响-4

1.2.2.1小麦幼苗培养-4

1.2.2.2实验方法-5

2结果分析-5

2.1酶蛋白质含量测定标准曲线的制作-5

2.2小麦苯丙氨酸解氨酶酶活、比活力测定-6

2.3逆境条件对小麦幼苗苯丙氨酸解氨酶的影响结果分析-7

2.3.1干旱胁迫-7

2.3.1.1干旱胁迫对种子萌发和生长的影响-7

2.3.1.1.1蛋白质标准曲线的制作-7

2.3.1.1.2酶活力、比活力计算结果与分析-7

2.3.2盐胁迫-7

2.3.2.1盐胁迫对种子萌发和生长的影响-7

2.3.2.1.1蛋白质标准曲线的制作-7

2.3.2.1.2酶活力、比活力计算结果与分析-7

2.3.3低温胁迫-8

2.3.3.1低温胁迫对种子萌发和生长的影响-8

2.3.3.1.1蛋白质标准曲线的制作-8

2.3.3.1.2酶活力、比活力计算结果与分析-8

讨论-10

结论

参考文献

致谢