鸡蛋中溶菌酶的制备.doc

摘要:通过用盐析法、超滤法和反胶团法，分别从蛋清中提取溶菌酶并制成干粉。然后对每种方法所得到的干粉，用分光光度法测定了其溶菌酶的含量和溶菌酶的活力。用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了三种方法提取的溶菌酶的纯度。

最后对三种提取溶菌酶的方法所得出的数据、聚丙烯酰胺凝胶电泳图以及三种实验方法的耗材和所用时间进行比较综合分析。发现用反胶团法提取的溶菌酶含量高、无杂质、活力也是三种方法中最大的，所以是三中提取方法中最优的。由于此方法并未大量的使用，也可以为以后溶菌酶的提取提供一个参考。     

关键词：盐析 超滤 反胶团 溶菌酶

目录

摘要

Abstract 

引言

1材料与方法-3

1.1 仪器与试剂-3

1.1.1 主要仪器-3

1.1.2 主要试剂、材料和溶液及配制-3

1.1.2.1主要试剂、材料-3

1.1.2.1主要溶液及配制-3

1.2 实验方法-5

1.2.1盐析法提取溶菌酶-5

1.2.1.1预处理-5

1.2.1.2盐析[13]-5

1.2.2超滤法提取溶菌酶[14]-5

1.2.2.1 预处理-5

1.2.2.2超滤-5

1.2.3反胶团法提取溶菌酶[15]-6

1.2.3.1 预处理-6

1.2.3.2 萃取-6

1.2.3.3 反萃取-6

1.2.3.4 冷冻干燥-6

1.2.4 三种方法的溶菌酶含量测定（分光光度法）[16]-6

1.2.4.1 标准曲线的绘制-6

1.2.4.1 试样的测定-7

1.2.5 三种方法所得溶菌酶活力测定（分光光度法）[16]-7

1.2.5.1 菌液的制备-7

1.2.5.2 试样的测定-7

1.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测三种方法所得溶菌酶纯度[17]-7

1.2.6.1 SDS-PAGE凝胶的配制及凝胶板的制备-7

1.2.6.2 样品的处理、加样和电泳-8

1.2.6.3 凝胶的剥离、染色及脱色-9

2 结果与分析-9

2.1 三种提取方法提取产率的比较-9

2.2 三种提取方法溶菌酶含量的计算和比较-9

2.3 三种提取方法溶菌酶活力的计算和比较-11

2.4 三种提取方法溶菌酶纯度比较-12

3 总结与讨论-12

结论

致谢

参考文献