磨黑盐矿产蛋白酶或淀粉酶菌株的分子鉴定.doc

摘要:蛋白酶和淀粉酶是目前应用最广、产量最大的两种酶，虽然现在已有一些主要的酶类从嗜盐菌中分离出来并进行了性质研究，但此类研究尚不能满足工业生产对菌株和酶性质的广泛要求。本实验通过对磨黑盐矿中分离得到的7株产淀粉酶或蛋白酶菌株进行染色体DNA的提取、16S rRNA基因PCR扩增和16S rRNA基因克隆测序，Blast结果表明:具有产胞外淀粉酶能力的菌株ZL4、ZL6、ZL5和ZL15属于短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）；具有产胞外蛋白酶能力的菌株L14属于地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis)；既有产胞外淀粉酶能力，又有产胞外蛋白酶能力ZL7和ZL19属于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。

关键词：磨黑盐矿；胞外蛋白酶；胞外淀粉酶；鉴定

目录

摘要

Abstract

1.前言-1

1.1盐矿微生物-1

1.2淀粉酶和蛋白酶-1

1.3 16S rRNA基因测序分类-1

1.4研究现状-1

1.5本实验的研究内容-2

2.材料与方法-3

2.1菌种-3

2.2仪器-3

2.3药品-3

2.4培养基制作-4

2.5纯化菌株-5

2.6甘油保存菌株-5

2.7胞外蛋白酶检测-5

2.8胞外淀粉酶检测-5

2.9染色体DNA的提取-6

2.10 16S rRNA序列分析-6

2.11同源性对比-8

3.结果与分析-9

3.1菌落纯化结果-9

3.2胞外蛋白酶和淀粉酶的检测-9

3.3DNA的提取-10

3.4 16S rRNA  PCR扩增-10

3.5克隆后的菌落PCR检测-11

3.6同源性对比-11

4.讨论-13

5.结论-14

参考文献-15

致 谢-17

附录A-18