分子标记技术在NaN3诱变小麦机制研究中的初步应用.doc

摘要:本试验采用不同浓度（0、0.005%、0.05%、0.5%和5%）的叠氮化钠（NaN3）溶液诱变小麦种子，研究不同浓度溶液诱变处理对小麦生长的影响，并且利用随机扩增多态性DNA（RAPD）分子标记技术，通过PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测，从分子水平对NaN3诱变小麦的机制进行初步分析。结果表明：不同浓度NaN3诱变小麦种子后，对种子的萌发具有一定的延滞作用，随着NaN3浓度的升高，小麦种子的发芽受到抑制，发芽率显著降低，小麦的根长、茎长和叶长均逐渐的减小。相反，NaN3诱变对小麦可溶性糖、可溶性蛋白、叶绿素等含量均有促进作用，且不同浓度的NaN3诱变后影响效果具有显著差异性，尤其在NaN3溶液为5%时效果最佳；不同浓度的NaN3诱变后小麦幼苗黄酮含量呈上升趋势，但各个处理组之间差异不显著。提取不同浓度NaN3诱变的小麦基因组DNA，分别以F09、E01、B03、H17为引物，对各处理的小麦基因组DNA进行PCR扩增，结果显示各条引物扩增后均出现差异性扩增条带，表明NaN3溶液诱变可以改变小麦的基因组DNA，从而改变小麦的表现性状。

关键词：小麦；NaN3；诱变；RAPD

目录

摘要

Abstract

1.前言-1

1.1小麦的概述-1

1.2 NaN3诱变的原理及研究现状-1

1.3 RAPD标记技术的原理及研究现状-1

1.4研究的目的及意义-2

2.材料与方法-3

2.1材料、仪器及试剂-3

2.2 NaN3诱变小麦种子-3

2.3小麦幼苗的培养-3

2.4外部形态指标的测定-3

2.5可溶性糖含量的测定-4

2.6可溶性蛋白含量的测定-5

2.7黄酮含量的测定-6

2.8叶绿素含量的提取和测定-7

2.9小麦基因组DNA的提取和检测-7

2.10小麦基因组随机多态性DNA的检测-8

2.11数据统计与分析-9

3.结果与分析-10

3.1不同浓度NaN3处理对小麦发芽势和发芽率的影响-10

3.2不同浓度NaN3处理对小麦根长、茎长及叶长的影响-10

3.3不同浓度NaN3处理对小麦的可溶性糖含量的影-10

3.4不同浓度NaN3处理对小麦的可溶性蛋白含量的影响-11

3.5不同浓度NaN3处理对小麦的黄酮含量的影响-11

3.6不同浓度NaN3处理对小麦的叶绿素含量的影响-11

3.7小麦基因组DNA的提取及检测结果-11

3.8小麦基因组随机多态性DNA的检测-17

4.讨论-16

5.结论-18

5.1不同浓度NaN3诱变对小麦幼苗的影响-18

5.2不同浓度NaN3诱变小麦基因组DNA多态性的分析-18

参考文献-20

致谢-22