蟹味菇活性肽的制备及其抗氧化研究.doc

摘要：首先在单因素的基础上，分别采用Box-Behnken试验对碱提酸沉法提取蟹味菇蛋白和中性蛋白酶酶解蟹味菇蛋白的工艺条件进行了优化；然后研究了酶解物的抗氧化活性。结果表明：最优提取工艺参数为液料比11.5mL/g、提取温度35.3℃和提取时间30.4min，在此提取条件下，得率可达到10.67%；最佳酶解工艺参数为酶浓度5.3%、pH值7.4和酶解温度47.6℃，此时水解度为30.42%；蟹味菇蛋白中性蛋白酶酶解物在质量浓度200μg/mL~1600μg/mL和160μg/mL~1120μg/mL范围内，其对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为22.82%～57.64%和29.46%～87.98%，且都存在明显的量效关系。

关键词 蟹味菇蛋白；碱提酸沉；酶解；抗氧化活性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 蟹味菇概况-1

1.1.1 来源-1

1.1.2 营养价值-1

1.2 蛋白质的提取方法-1

1.2.1 碱提酸沉法-1

1.2.2 TCA-丙酮沉淀法-1

1.2.3 反胶团萃取法-2

1.2.4 醇洗法-2

1.3 蛋白肽的制备方法-2

1.3.1 溶剂提取法-2

1.3.2 酶法-2

1.3.3 微生物发酵法-3

1.3.4 膜法分离技术-3

1.3.5 固相合成法-3

1.3.6 利用重组DNA技术合成活性肽-3

1.4 抗氧化性测定方法-3

1.4.1 FRAP法-4

1.4.2 ORAC法-4

1.4.3 TRAP法-4

1.4.4 PCL法-4

1.4.5 ABTS法-4

1.4.6 DPPH法-4

1.4.7 羟基自由基法-5

1.5 本课题的研究意义及主要研究内容-5

2 材料与方法-6

2.1 原料与试剂-6

2.2 仪器与设备-6

2.3 方法-6

2.3.1 蟹味菇蛋白的提取-6

2.3.2 蟹味菇蛋白的酶解-7

2.3.3 蟹味菇蛋白肽的抗氧化活性-8

3 结果与分析-10

3.1 蟹味菇蛋白的提取-10

3.1.1 单因素试验-10

3.1.2 Box-Behnken试验-11

3.2 蟹味菇蛋白的酶解-14

3.2.1 单因素试验-14

3.2.2 Box-Behnken试验-15

3.3 蟹味菇蛋白肽的抗氧化-18

3.3.1 对DPPH自由基的清除作用-18

3.3.2 对羟基自由基的清除作用-18

结论-19

致谢-20

参考文献-21