生姜提取物活性成分的高速逆流色谱分离.doc

摘要：以生姜粉为原料，选择不同极性溶剂对其分级处理，对其中多酚含量较高的乙酸乙酯提取馏分进行高速逆流色谱制备分离。以高效液相色谱（HPLC）测定分配系数法优选高速逆流色谱（HSCCC）分离的最佳溶剂体系，探讨高速逆流色谱仪的流动相流速、转速、分离温度等因素对生姜活性成分分离的影响。确定了最佳的HSCCC分离条件：溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（5:5:5:5，v/v），流速2 mL/min、转速800 r/min、分离温度25℃，经一次HSCCC即可从生姜提取物中分离得到单体组分，经HPLC分析为6-姜酚，纯度达98%。

对分离得到的6-姜酚进行抗氧化性分析，结果表明具有一定的清除羟基自由基和DPPH自由基能力，清除能力与浓度呈较明显的量效关系；稳定性实验表明，姜酚在非碱性条件下对温度、时间和光照等具有较好的稳定性，适用于食品生产。

关键词 姜酚；高速逆流色谱分离；抗氧化性；稳定性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 生姜-1

1.2 姜酚的性质及其结构-1

1.3 姜酚的功能-1

1.3.1 降低血脂和血糖-1

1.3.2 抗炎和止痛作用-2

1.3.3 止吐的作用-2

1.3.4 抗氧化的作用-2

1.3.5 抗菌作用-2

1.4 高速逆流色谱技术概述及其研究进展-3

1.4.1 高速逆流色谱的起源-3

1.4.2 HSCCC的原理-3

1.4.3 溶剂体系的选择-3

1.4.4 HSCCC的优点及应用前景-7

1.5 抗氧化性机理-8

1.5.1 羟基自由基的清除作用-8

1.5.2 DPPH自由基的清除作用-8

1.6 姜酚的检测方法-8

1.6.1 紫外分光光度法-8

1.6.2 高效液相色谱法-9

1.7 实验目的与意义-9

2 实验与方法-11

2.1 仪器与试剂-11

2.1.1 主要仪器-11

2.1.2 主要试剂-11

2.1.3 主要原材料-11

2.2 原料的预处理-11

2.3 检测条件-12

2.4 标准曲线的绘制-13

2.5 实验方法-13

2.5.1 溶剂体系的选择与优化-13

2.5.2 样品溶液的制备-14

2.5.3 高速逆流色谱分离过程-14

2.5.4 高速逆流色谱分离条件优化-15

2.5.5 分离组分的HPLC分析-15

2.5.6 姜酚抗氧化性研究-15

2.5.7 姜酚稳定性研究-16

3 结果与分析-18

3.1原料的预处理-18

3.2 溶剂体系的选择与优化-20

3.3 高速逆流色谱分离及条件优化-21

3.3.1 主机分离管路体积的测定-21

3.3.2 固定相保留率的测定-21

3.3.3 流动相流速的影响-22

3.3.4 转速的影响-22

3.3.5 分离温度的影响-23

3.4 高速逆流色谱的分离效果-24

3.5 HSCCC峰成分及纯度测定-25

3.6 姜酚抗氧化性研究-26

3.6.1 姜酚对羟基自由基清除率的测定-26

3.6.2 姜酚对DPPH自由基清除率的测定-26

3.7 姜酚的稳定性研究-27

3.7.1 温度对姜酚稳定性的影响-27

3.7.2 时间对姜酚稳定性的影响-28

3.7.3 光照对姜酚稳定性的影响-28

3.7.4 酸碱度对姜酚稳定性的影响-28

结论-30

致谢-31

参考文献-32