亚硝化细菌紫外线诱变育种的研究.doc

摘要:本文采用原生质体诱变技术，以紫外线作为诱变剂来诱变亚硝化细菌的原生质体。向亚硝化细菌菌液加入浓度为40μg/mL氨苄青霉素钠，24℃作用6d至生长对数期，加入终浓度为0.5μg/mL溶菌酶，40℃处理15min。实验结果表明：当紫外线诱变时间为30s、60s、120s时，经诱变的菌株培养液中亚硝酸盐氮含量的最大值与未诱变比较有较大的提高，其中诱变时间为30s的菌株所测的亚硝酸盐氮含量达到最高。再将诱变30s的的菌株进行250mL、500mL扩大化培养，菌种亚硝态氮富集能力与未诱变菌株相比有明显的提高，氨氮去除率最高为80.21%，亚硝化细菌数量最高达到1.1×107 个，具有较好的稳定性。

关键词：亚硝化细菌；原生质体；紫外线；诱变

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 亚硝化细菌的概况-1

1.2 原生质体诱变技术-1

1.3 诱变育种-2

1.3.1 物理诱变-2

1.3.2 化学诱变-4

1.4 本论文研究的目的及意义-6

2 材料与方法-7

2.1 实验试剂与仪器-7

2.1.1 实验试剂-7

2.1.2 实验器材-8

2.2 实验方法-8

2.2.1 实验材料-8

2.2.2 菌种的活化与培养-8

2.2.3 原生质体的制备-9

2.2.4 紫外线诱变原生质体与再生-9

2.2.5 诱变菌株的扩大培养-9

2.2.6 标准曲线的绘制-9

2.2.7 相关数据测定-12

3 结果与讨论-14

3.1 诱变后亚硝化细菌原生质体再生菌落形态-14

3.2 紫外线诱变时间与致死率的关系-15

3.3 亚硝酸盐氮含量测定-16

3.4 优良菌株的扩大培养-18

3.5 优良菌株脱氮能力的研究-20

结论-23

致谢-24

参考文献-25