三聚氰胺人工抗原的合成与抗体制备.doc

摘要:三聚氰胺（Melamine，Mela）是一种化工原料，由于其含氮量高达66.6%，因此常被非法添加到牛乳及饲料中，严重威胁到人类和动物的生命安全。目前的检测方法大多需要专门的仪器设备而且操作繁琐，已无法满足现场快速检测的要求。因此，研究和建立一种方便、快速和安全的检测方法具有深远的意义。本实验采用戊二醛法，将三聚氰胺与载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白(OVA)分别进行偶联，制备出人工免疫抗原和检测抗原。且测得三聚氰胺与BSA和OVA的偶联比分别为24：1和15：1，比值适中，证明本实验人工抗原的合成非常成功。采用免疫BALB/c小鼠，同时利用间接ELISA方法测定小鼠抗三聚氰胺血清效价，得到效价值为1：6400，达到要求从而说明产生了抗体。

关键词：三聚氰胺；人工抗原；单克隆抗体；检测

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1三聚氰胺简介-1

1.2 三聚氰胺的理化性质-1

1.2.1三聚氰胺的物理性质-1

1.2.2三聚氰胺的化学性质-2

1.3 三聚氰胺的合成工艺-2

1.4 三聚氰胺的用途-3

1.4.1正常用途-3

1.4.2 非法用途-3

1.5三聚氰胺的残留及危害-4

1.5.1三聚氰胺的代谢-4

1.5.2 三聚氰胺的危害-4

1.6 三聚氰胺的检测方法-5

1.6.1 三聚氰胺的传统检测方法-5

1.6.2 微量三聚氰胺的检测方法-5

1.6.3三聚氰胺的实验室检测方法-7

2材料与方法-8

2.1实验材料-8

2.1.1实验试剂-8

2.1.2实验仪器-9

2.2实验方法-9

2.2.1人工抗原的合成-9

2.2.2合成抗原的鉴定-9

2.2.3动物免疫-10

2.2.4 间接ELISA检测抗血清及单抗效价方法的建立-10

3结果与分析-12

3.1 实验结果-12

3.1.1 SDS-PAGE结果-12

3.1.2 紫外可见分光光度计测定结果-12

3.1.3间接ELISA方法的建立-13

3.1.4免疫小鼠抗Mela血清效价-14

3.2 分析-14

结论-16

致谢-17

参考文献-18