黑虎掌菌多糖的提取及纯化研究.doc

摘要:为优化黑虎掌菌多糖的提取工艺，通过单因素试验考察了液料比、浸提温度和浸提时间对黑虎掌菌多糖得率的影响，在单因素试验的基础上，采用Box-Behnken设计，建立并分析了各因素与多糖得率关系的数学模型；采用乙醇分级沉淀法分离纯化黑虎掌菌多糖，获得了乙醇体积分数为30%、40%、50%、60%、70%条件下沉析出的5个多糖组分SAP-1、SAP-2、SAP-3、SAP-4、SAP-5；以DPPH自由基清除率、还原力、羟基自由基清除率为指标，评价了5个多糖组分的抗氧化活性。结果表明热水浸提黑虎掌菌多糖的最佳工艺条件为液料比为27 mL/g、浸提温度为86.2 ℃、浸提时间为3.3 h，在此条件下黑虎掌菌多糖得率可达10.32%，验证试验表明该模型具有较好的预测性能，可用于指导生产实践；黑虎掌菌多糖各个组分均呈现出较好的抗氧化活性，在一定质量浓度范围内，各个多糖组分对DPPH自由基的清除率、还原力均与多糖质量浓度呈线性正相关；SAP-4的抗氧化能力最强，其清除DPPH自由基的IC50值为0.0309 g/L。

关键词: 黑虎掌菌；多糖；响应面法；分级沉淀；抗氧化活性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 黑虎掌菌的研究概况-1

1.1.1 黑虎掌菌的营养成分-1

1.1.2 黑虎掌菌的药用价值-1

1.2 食用菌多糖提取技术的研究进展-2

1.2.1 溶剂浸提法-2

1.2.2 超声辅助提取法-3

1.2.3 微波辅助提取法-3

1.2.4 超临界流体萃取法-3

1.2.5 酶法-4

1.3 多糖纯化技术的研究进展-4

1.3.1 膜分离法-4

1.3.2 有机溶剂萃取法-4

1.3.3 柱层析法-5

1.4 研究意义及内容-5

2 材料与方法-7

2.1 原料与试剂-7

2.2 仪器与设备-7

2.3 方法-8

2.3.1 原料预处理-8

2.3.2 热水提取工艺-8

2.3.3 黑虎掌菌粗多糖得率的测定-8

2.3.4 单因素试验-9

2.3.5 Box-Behnken试验设计-9

2.3.6 黑虎掌菌多糖的乙醇分级沉淀-9

2.3.7 抗氧化活性测定-10

3 结果与分析-11

3.1 葡萄糖标准曲线的制作-11

3.2 单因素试验-11

3.2.1 液料比对多糖得率的影响-11

3.2.2 浸提温度对多糖得率的影响-12

3.2.3 浸提时间对多糖得率的影响-12

3.3 Box-Behnken试验设计-13

3.3.1 回归模型的建立与检验-13

3.3.2 两因素间的交互效应分析-14

3.3.3 最佳条件优化及验证结果-14

3.4 黑虎掌菌多糖的抗氧化活性-15

3.4.1 清除DPPH自由基的能力-15

3.4.2 还原力-16

3.4.3 清除羟基自由基的能力-17

结论-18

致谢-19

参考文献-19