国槐内生真菌的分离纯化和抗氧化性研究_食品生物工程.doc

摘要:本论文是将国槐枝干的韧皮部分进行培养，将培养出来的菌株进行3～5次分离纯化，主要包括毛霉，青霉，曲霉和根霉四大类，其中GH-3、GH-35属于毛霉，GH-2、GH-4属于青霉，GH-1、GH-6、GH-24、GH-25属于曲霉，GH-7、GH-10、GH-14、GH-19、GH-21、GH-22属于根霉。再将得到的14个菌株进行发酵和萃取处理，将得到的各相萃取液通过DPPH抗氧化测定方法测定抗氧化活性，筛选出抗氧化活性最强的菌株萃取相，并确定GH-2的乙酸乙酯相为研究对象，其抗氧化活性最强，DPPH自由基清除率为92.28%。,然后用薄层点样的方法，经展开剂展开后，通过碘蒸汽熏蒸和紫外光分析仪的检测，确定其最佳抗氧化斑点的Rf值为0.57。通过凝胶柱层析和硅胶柱层析方法的分离，L-1和L-2为纯度较高的样品，再用高效液相色谱和薄层层析法进行活性验证，均验证为纯度较高的样品。

关键词 国槐内生真菌；分离纯化；发酵液；抗氧化性

目录

1 绪论-1

1.1 内生真菌的概述-1

1.1.1 真菌简介-1

1.1.2 植物内生真菌-1

1.2 药用植物内生真菌生物活性物质概述-2

1.2.1生物碱类-2

1.2.2萜类-2

1.2.3醌类-3

1.2.4木脂素类-3

1.2.5环肽类-3

1.2.6其他类-3

1.3 国槐简介-3

1.4 本项目研究目的及意义-4

2 材料与方法-5

2.1 实验材料-5

2.1.1 实验菌种-5

2.1.2 化学试剂-5

2.1.3 仪器-5

2.1.4 培养基-6

2.2 实验方法-6

2.2.1 采样、菌株的分离纯化及分类-6

2.2.2菌株摇瓶发酵液培养及样品处理-6

2.2.3 国槐内生真菌抗氧化活性研究-7

2.2.4菌株抗氧化活性组分的分离纯化-8

3结果与分析-11

3.2 菌株的确定-13

3.3展开剂的确定-14

3.4活性组分的初步分离-16

3.5活性组分的二次分离-16

3.6活性组分的进一步纯化-17

3.7纯度验证-17

3.7.1高效液相色谱法-17

3.7.2 薄层层析法（TLC）-18

结论-20

致谢-21

参考文献-22