摘要:本课题以食品生物工程实验中心酶工程实验室保藏的黑曲霉08013号菌株为出发菌株,对其进行菌种诱变选育,以期得到高产内切型菊粉酶菌株。
首先对出发菌株进行初始酶活的测定,以牛蒡为唯一碳源,测得黑曲霉08013号菌株中菊粉酶初始酶活为0.52U/mL。
然后用紫外线(15W预热20min,垂直距离30cm诱变35min)对08013号菌株进行菌种诱变,从诱变菌株中选出20株菌落直径最大的菌株进行内切型菌粉酶的酶活测定,从中筛选出一株酶活最高的菌株,为09-ZZ-015号菌株,其酶活为2.30U/mL,比出发菌株的酶活提高了342.31%。
再对09-ZZ-015号菌株进行氯化锂(处理浓度为1%)诱变,诱变10min,从诱变菌株中选出20株菌落直径最大的菌株进行内切型菌粉酶的酶活测定,从中筛选出一株酶活最高的菌株,为09-ZZ-015-L012号菌株,其酶活为2.59U/mL,比原始菌株的酶活提高了398.08%。
关键词 内切型菊粉酶;黑曲霉;诱变;紫外线;氯化锂;筛选