呋喃丹单克隆抗体制备与检测_食品生物工程.doc

摘要:呋喃丹作为一种高效、广谱的杀虫剂而被普遍使用。但因其为口属剧毒类农药，国家农药残留标准中已规定其在粮食和蔬菜中不得检出，但还是有人因为其效果高效而违禁使用，这严重危害了消费者的健康。因此，建立快速、灵敏准确、批量的检测方法是势在必行。本研究以经检测过的已合成成功的BFNH-BSA作为免疫抗原，以皮下多点注射法注入到BALB/C 雌性小鼠，刺激其淋巴细胞产生专一性呋喃丹抗体，以BFNH-OVA为包被抗原包被酶标板，通过间接ELISA法测定血清的抗体效价，效价最高者可达1：20000，选出高效价的细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合，制备高亲和力呋喃丹单克隆抗体。

关键词:呋喃丹；ELISA；细胞融合；单克隆抗体

目录

1 绪论-1

1.1 农药概况-1

1.1.1 农药的现状及危害-1

1.1.2 农药的检测方法-1

1.2 呋喃丹概况-3

1.2.1 呋喃丹简介-3

1.2.2 呋喃丹的危害-3

1.3 应用技术简介-4

1.3.1 ELISA简介-4

1.3.2 细胞融合简介-4

1.3.3 单克隆抗体-5

1.4 本论文研究的目的及意义-5

2 材料与方法-6

2.1 实验试剂与仪器-7

2.1.1 实验试剂-7

2.1.2 实验主要溶液系统-7

2.1.3 实验仪器-7

2.1.4 实验材料-8

2.2 实验方法-8

2.2.1 动物免疫-8

2.2.2 细胞融合-9

2.2.3 单克隆抗体细胞的筛选及初步鉴定-11

3 结果与分析-12

3.1 包被抗原最适反应浓度的确定-12

3.2 免疫小鼠多抗血清的检测结果-12

3.3 细胞融合与筛选-12

3.4 间接竞争ELISA的结果-13

结论-14

致谢-15

参考文献-16