醋酸杆菌中乙醛脱氢酶的提取工艺_食品生物工程.doc

摘要:本研究以实验室保存的醋酸杆菌为材料，研究醋酸杆菌的破碎方法，得出破碎醋酸杆菌较好的方法有超声波法，曲拉通法以及溶菌酶酶法，可以得到较高的蛋白质含量和较高的乙醛脱氢酶(ALDH)酶活。进行破碎方法联合时发现超声波法容易使ALDH失活，故采用曲拉通与溶菌酶联合破碎方法。优化此方法时得到的最优条件如下：溶菌酶浓度为7mg/mL，溶菌酶作用时间80min，曲拉通浓度是10%，曲拉通作用时间为8min。此条件下得到ALDH的最高酶活为0.502U/mL。

关键词：醋酸杆菌；破碎方法；ALDH；蛋白质含量；酶活

　　　目前认为，大量饮酒导致的毒性反应不是乙醇造成的,而是乙醇在体内代谢产物乙醛造成的。乙醛具有强烈的毒理作用，它能促进人体内儿茶酚胺的释放，既而会导致心率加快、心排血量增加、外周血管扩张等生理反应，更有部分人会表现出面部潮红[3]。

　　　尽管乙醛在大量组织中很快被代谢，但在乙醇氧化时，乙醛的代谢产物就会大量积聚在肝脏和血液中，而细胞膜在进行脂质过氧化时，血液中的乙醛浓度也会增加。大量的乙醛会与血细胞成分进行可逆性结合，经血液运输并在心脏外组织释放。乙醛与多种蛋白质进行共价结合，从而改变器官的功能与结构。乙醛与蛋白质的加合物的会损害许多酶的催化功能，导致抗乙醛抗原决定簇抗体的产生，结果会加重乙醇对肝损害的诱导[2]。

　　　ALDH的生理意义主要在于它能够对乙醛的解毒作用。各种各样的酒类都含有酒精，饮酒后可导致心跳速率加快、血压升高、脸红、皮肤变热的急性酒精中毒的症状，而人类因个体和种族的差异对酒精的耐受能力也有所不同，有数据表示，黄种人中对酒精敏感的几率为80%[4]。在饮酒后，大多数黄种人由于缺少乙醛脱氢酶，使得乙醛在体内大量积累，从而导致酒精中毒。解酒关键在于加速分解乙醛，使之生成乙酸，再进一步分解为CO2和H2O，而在这过程中ALDH的作用甚为重要[5]。眼组织可以通过光照射、紫外光吸收和氧的供应合成大量的过氧化醛，而角膜和晶状体ALDHs可迅速降解合成的过氧化醛，而发挥重要的解毒作用[6]。