甲基对硫磷单克隆抗体的制备和检测.rar

摘要:甲基对硫磷(methyl parathion)是一种高毒有机磷酸酯类杀虫剂，其应用非常广泛，包括防治水稻、棉花、玉米上的很多害虫。甲基对硫磷的检测一般采用薄层层析，气相色谱法(GC)，高效液相色谱法(HPLC)，采用这些方法时前处理比较麻烦，而且样本成分比较复杂，因此需要采取不同的分析方法。本实验主要是对已经制备好的甲基对硫磷人工抗原进行检测其浓度，然后再用其免疫BALB/C小鼠，免疫后在小鼠体内会产生抗体，再取出能产生抗体的细胞，然后利用ELISA法检测血清的抗体水平，效价是1:6400，达到了和SP2/0细胞的细胞融合的要求。

关键词 农药残留；免疫分析法；抗体；检测

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 农药检测-1

1.2 单克隆抗体的生产及应用-1

1.2.1 单克隆抗体的生产过程-3

1.2.2 单克隆抗体的应用-3

1.3 甲基对硫磷单克隆抗体的概况-4

1.4 甲基对硫磷单克隆抗体研究背景-4

1.5 本课题的研究目的及意义-5

2 材料与方法-6

2.1 实验材料-6

2.1.1 主要原料与试剂-6

2.1.2 主要仪器设备-8

2.2 实验方法-8

2.2.1 小鼠饲养-8

2.2.2 小鼠免疫-8

2.2.3 甲基对硫磷人工抗原最佳包被浓度的确定-9

2.2.4 血清抗体水平的检测-9

2.2.5 细胞融合和杂交瘤细胞的选择性培养-10

2.2.6 杂交瘤细胞的筛选和杂交瘤细胞的克隆化-13

2.2.7 甲基对硫磷单克隆抗体的鉴定-13

3 实验结果分析-15

   3.1 间接ELISA法测定抗体的吸光度值-15

   3.2 血清效价的测定-15

   3.3 甲基对硫磷抗体杂交瘤细胞株的筛选和克隆-16

   3.4 杂交瘤细胞培养液中McAb的浓度测定-16

   3.5讨论-17

结论-18

致谢-19

参考文献-20