斑褐孔菌多糖的分离纯化与理化性质分析.doc

摘要：采用单因素试验与Box-Behnken试验设计优化斑褐孔菌多糖的热水浸提工艺，得到热水浸提斑褐孔菌多糖的最佳工艺如下：液料比30 mL/g，浸提温度80.21 ℃，浸提时间2.09 h，此时斑褐孔菌粗多糖得率为1.64%。采用DEAE-52离子交换层析柱分离纯化斑褐孔菌粗多糖，获得3个多糖组分命名为F1、F2和F3。纯化后的多糖组分从溶解性方面可以看出均能在去离子水、稀碱溶液中完全溶解，而在二甲基亚砜中溶解度极低，在无水乙醇、氯仿等其他有机溶剂中均不能溶解；从化学组成方面来说该多糖中F1、F2和F3均含有糖类、糖醛酸和蛋白质，无游离还原糖及多酚类物质。

关键词 斑褐孔菌；热水浸提；多糖；分离纯化；理化性质

目录

摘要

Abstract

1绪论-1

1.1斑褐孔菌的研究现状-1

1.2真菌多糖提取的几种方法-1

1.2.1水浴法-1

1.2.2酶解法-1

1.2.3超声波提取法-1

1.2.4微波提取法-1

1.3多糖的分离纯化-2

1.3.1脱蛋白-2

1.3.2脱色-2

1.3.3脱盐及小分子物质的去除-2

1.3.4真菌多糖的纯化方法-3

1.3.5多糖纯度的鉴定-3

1.4多糖的生物活性-3

1.4.1抗肿瘤活性-3

1.4.2抗衰老活性-3

1.4.3抗氧化活性-3

1.4.4免疫调节活性-4

1.4.5降血糖、降血脂活性-4

1.5研究的意义及主要内容-4

2材料与方法-5

2.1仪器与设备-5

   2.2原料与试剂-5

2.3实验方法-5

2.3.1原材料预处理-5

2.3.2斑褐孔菌多糖的热水浸提工艺-6

2.3.3斑褐孔菌多糖得率测定-6

2.3.4水浴法提取斑褐孔菌多糖的工艺优化-6

2.3.5斑褐孔菌多糖的DEAE-52纤维素柱色谱-7

2.3.6斑褐孔菌多糖的理化性质研究-8

3结果分析-10

3.1葡萄糖质量标准曲线-10

3.2单因素试验-10

3.2.1液料比对斑褐孔菌多糖得率的影响-10

3.2.2热水浸提时间对斑褐孔菌多糖得率的影响-11

3.2.3热水浸提温度对斑褐孔菌多糖得率的影响-11

3.3响应面优化-11

3.3.1 Box-Behnken试验设计及结果分析-11

3.3.2交互效应分析-13

3.3.3最佳工艺优化及验证结果-13

   3.4 DEAE-纤维素洗脱曲线-14

3.5标准曲线及理化性质-14

3.5.1蛋白质标准曲线-14

3.5.2糖醛酸标准曲线-15

3.5.3硫酸基标准曲线-15

3.5.4主要理化性质分析-16

3.5.5斑褐孔菌多糖的溶解性检测-16

3.5.6其他理化性质分析-16

结论-16

致谢-18

参考文献-19