高产醋酸菌乙醇脱氢酶酶学性质的研究.doc

摘要：本研究以实验室保存的高产醋酸菌为出发菌株，研究菌株的培养条件，得出菌株产乙醇脱氢酶（ADH）的最优条件如下：最适pH为6.0，最适温度为32℃，最佳装液量为50 mL，最佳接种量为10%，此条件下最高酶活为0.409 U/mL。并对ADH粗酶液的酶学特性做了详细研究，结果显示ADH的最适作用pH值在4.0-7.0，pH值为4.0时酶活力达到最大，pH值为4.0-7.0时酶活力较为稳定；ADH的最适作用温度为35℃，温度为25-40 ℃时酶活力较稳定。Mg2+是ADH的激活剂，K+对酶活的影响不是很大，Ca2+、Na+、Ba2+、Al3+、Zn2+、Mn2+是该酶的抑制剂。

关键词：醋酸杆菌；酶学性质；乙醇脱氢酶；产酶条件；优化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 食醋与食醋产业-1

1.1.1 食醋的概述-1

1.1.2 我国食醋产业的发展状况-1

1.2醋酸菌的研究进展及应用-1

1.2.1醋酸菌的概述-1

1.2.2醋酸菌的生物学特性-2

1.2.3醋酸菌的改良-2

1.2.4 醋酸菌的生理及代谢调控-2

1.3乙醇脱氢酶的研究进展及应用-3

1.3.1 乙醇脱氢酶的概述-3

1.3.2 乙醇脱氢酶的应用-3

1.3.3 乙醇脱氢酶的分离和纯化方法-4

1.4 本论文的研究意义和内容-5

1.4.1 本论文的研究意义-5

1.4.2 本论文的研究内容-5

2 材料和方法-6

2.1 实验材料-6

2.1.1 菌种-6

2.1.2 主要实验仪器-6

2.1.3 主要实验试剂-6

2.1.4 培养基-7

2.2 试验方法-7

2.2.1 菌种的斜面活化-7

2.2.2 种子液摇瓶培养-8

2.2.3 发酵培养-8

2.2.4 产酶条件的优化-8

2.2.5 乙醇脱氢酶酶活的测定-8

2.2.6 乙醇脱氢酶酶学性质的研究-9

3.结果与分析-11

3.1 产酶条件的优化-11

3.1.1 培养温度的优化-11

3.1.2 发酵培养基初始pH值的优化-11

3.1.3 装液量的优化-11

3.1.4 接种量的优化-12

3.2 酶学性质的研究-12

3.2.1 最适温度的研究-12

3.2.2 温度稳定性的研究-13

3.2.3 最适pH的研究-14

3.2.4 pH稳定性的研究-14

3.2.5 金属离子对酶活的影响-15

结论-16

致谢-17

参考文献-18