一株耐镉肠杆菌的分子鉴定和抗性分析.doc

摘要:本文对一株耐镉肠杆菌NP23进行了分子鉴定和抗性分析。经形态学观察和16S rDNA序列分析，确定NP23是Enterobacter sp.。在不同镉浓度液体培养基条件下研究了菌体的生长曲线。采用SDS法进行质粒消除，用鉴别培养基初步判断出NP23的抗镉基因在基因组上。分析NP23对Fe2+，Cu2+，Mn2+, Zn2+  等其他重金属抗性，结果显示NP23对这四种重金属都有一定抗性，其中对Zn2+和Mn2+的抗性较强，在3200 mg/L以上。 

关键词：重金属抗性；镉；肠杆菌；质粒消除

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 土壤重金属污染现状及危害-1

1.1.1 土壤重金属污染-1

1.1.2 土壤重金属主要污染来源-1

1.1.3 土壤镉污染来源-2

1.1.4 镉的危害-3

1.2 土壤重金属污染修复-5

1.2.1植物修复-5

1.2.2 微生物修复-6

1.3 根际环境-7

1.3.1 镉污染土壤的根际环境调节-7

1.3.2 根际微生物在土壤中的作用-8

2材料与方法-9

2.1 实验材料-9

2.1.1 菌株-9

2.1.2 药品-9

2.1.3 主要仪器设备-9

2.2 实验方法-10

2.2.1 培养基的配制-10

2.2.2 高压灭菌及操作台的消毒-11

2.2.3 进行PCR扩增16S rDNA-12

2.2.4 不同Cd2+浓度中NP23的生长曲线测定-13

2.2.5 探究抗药性基因的位置-14

2.2.6 抗药性基因的获得与验证-14

2.2.7 NP23对其他重金属的耐受性-15

3 结果与讨论-16

3.1 实验结果-16

3.1.1 16S rDNA序列的测定和分类分析-16

3.1.2 NP23在不同Cd2+浓度培养基中的生长曲线-17

3.1.3 NP23质粒消除分析-17

3.1.4 NP23对其他重金属抗性测定-17

3.2 分析讨论-18

3.2.1 NP23在不同Cd2+浓度培养基中的生长曲线分析-18

3.2.2 NP23质粒消除分析-19

3.2.3 NP23对其他重金属抗性测定分析-19

3.2.4 耐重金属细菌的研究方向-19

结论-21

致谢-22

参考文献-23