枯草芽孢杆菌抗菌蛋白理化性质研究.doc

摘要:抗菌蛋白是一种抗菌能力强、抗菌谱非常广、种类比较多，不易使微生物产生抗性的多肽，在医药、化妆品、农药、添加剂、防腐剂、抗病基因工程方面将有很广阔的前景。

在学校附近多点采取样品，筛选得到枯草芽孢杆菌高产抗菌蛋白菌株K-72。然后发酵条件进行简单优化，确定影响因素，接种量为8 %，温度为25 ℃，发酵时间为32 h时，抗菌蛋白抑菌活性较高。

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为实验材料，以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作指示菌，采用抑菌圈法，结果表明抗菌蛋白对金黄色葡萄球菌的抗菌活性在室温至70 ℃处理30 min时无明显影响，90 ℃处理30 min，其活性仅下降16.7 %；在pH值2-7的范围内抗菌蛋白活性无明显变化；经过氯仿异丙酮处理后抗菌蛋白活性保持最好；抗菌蛋白对亚铁离子和镁离子比较敏感；紫外照射8 h后对其活性具有明显的抑制作用，其具有广阔的抗菌谱。

关键词：枯草芽孢杆菌；抗菌蛋白；理化性质；稳定性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 枯草芽孢杆菌研究进展-1

1.1.1 枯草芽孢杆菌的主要特征-1

1.1.2 枯草芽孢杆菌抑菌机制-1

1.1.3 枯草芽孢杆菌抗菌性次生代谢产物-3

1.2 抗菌蛋白研究进展-3

1.2.1 抗菌蛋白种类及抗菌机理-3

1.2.2 抗菌蛋白质研究展望-4

1.3 抗菌蛋白的应用-4

1.3.1 在食品安全方面的应用-4

1.3.2 在植物病害方面的应用-5

1.3.3 在医药方面的应用-5

1.4 抗菌蛋白的研究意义-5

1.4.1 选题背景-5

1.4.2 研究意义-5

2 材料与方法-7

2.1 试剂与器材-7

2.1.1 主要试剂-7

2.1.2 主要仪器-7

2.2 方法-8

2.2.1 培养基的配制-8

2.2.2 培养基配制注意事项-9

2.2.3 菌株的获得-10

2.2.4 形态特征观察-11

2.2.5 发酵条件优化-11

2.2.6 抗菌蛋白理化性质研究-12

2.2.7 对微生物的拮抗作用-13

3 结果与分析-14

3.1 菌落的筛选-14

3.2 菌株染色和菌落观察-14

3.3 发酵条件研究-15

3.3.1 发酵时间优化-15

3.3.2 发酵温度优化-15

3.4 抗菌蛋白理化性质研究-16

3.4.1 对热稳定性研究-16

3.4.2 对有机溶剂的稳定性-17

3.4.3 对酸碱的稳定性-17

3.4.4对紫外线的稳定性-18

3.4.5 对金属离子的稳定性-18

3.5 对几种真菌、细菌的拮抗作用-19

3.5.1 对几种细菌的拮抗作用-19

3.5.2对几种真菌的拮抗作用-20

结论-21

致谢-22

参考文献-23