摘要:本研究以醋醅中分离筛选得到的高产醋酸菌为出发菌株,通过对菌株培养条件的研究,得出最优发酵培养的条件如下:最宜培养温度为32℃,最适pH为5.0,最佳接种量为10%,最佳装液量为50 mL。此时,醋酸菌产乙醛脱氢酶的酶活为0.893 U/mL。并对乙醛脱氢酶粗酶液的酶学特性做了详细研究,结果显示乙醛脱氢酶的最适作用pH为6.0; pH 5.0 ~6.0时酶的稳定性较好;最适作用温度为50℃;在25~45℃热稳定性较好,此后,随着温度升高,酶活就迅速降低,65℃时几乎完全失活; Ca2+、Al3+是酶的激活剂,K+、Na+、Mg2+、Fe2+和Ba2+对该酶有一定的抑制作用,Mn2+对该酶的抑制作用稍强,能使酶活降低54%,Zn2+对该酶有较强的抑制作用,能使酶活降低94%。
关键词: 醋酸菌;乙醛脱氢酶;条件优化;酶学性质
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 食醋的概述-1
1.2 食醋发酵工艺-1
1.3 醋酸菌的概述-1
1.3.1 醋酸菌的的分类-1
1.3.2 醋酸菌的选育研究现状-1
1.4 乙醛脱氢酶的种类及来源-2
1.4.1 乙醛脱氢酶的种类-2
1.4.2 乙醛脱氢酶的来源-2
1.5乙醛脱氢酶的结构和性质-3
1.6乙醛脱氢酶的应用与发展-3
1.6.1乙醛脱氢酶的应用-3
1.6.2乙醛脱氢酶的发展前景-5
1.7本文研究的意义和内容-5
1.7.1本文研究的意义-5
1.7.2本文研究的内容-5
2 材料与方法-6
2.1实验材料-6
2.1.1菌种-6
2.1.2培养基 -6
2.1.3主要仪器-6
2.1.4主要试剂-6
2.2实验方法-7
2.2.1斜面活化-7
2.2.2 摇瓶发酵-8
2.2.3培养条件的优化-8
2.2.4乙醛脱氢酶酶活的测定-8
2.2.5 乙醛脱氢酶酶学性质的研究-9
3结果与分析-11
3.1 发酵培养条件的优化-11
3.1.1 发酵培养基初始pH对酶活的影响-11
3.1.2 培养温度对酶活的影响-11
3.1.3 接种量对酶活的影响-12
3.1.4 装液量对酶活的影响-13
3.2 酶学性质的研究-13
3.2.1 酶作用的最适pH-13
3.2.2 酶的pH稳定性-14
3.2.3 酶作用的最适温度-14
3.2.4 酶的热稳定性-15
3.2.5 金属离子对酶活的影响-16
结论-17
致谢-18
参考文献-19