乙醇脱氢酶pH稳定剂的筛选.doc

摘要:本试验以醋醅中筛选的高产醋酸菌为原始菌株，对乙醇脱氢酶pH稳定性做了一定的研究，结果表明乙醇脱氢酶在pH 7~10时pH稳定性较好，此后，随着pH提高，酶活降低。通过对pH稳定剂的研究发现，一定浓度下的硫酸铁、硫酸铵、氯化钾、蔗糖对该酶有一定的pH稳定作用。并得出最优乙醇脱氢酶pH稳定剂组合：硫酸铵25 mmol/L、氯化钾25 mmol/L、硫酸铁25 mmol/L、蔗糖0.5 mmol/L。在此情况下，不同pH条件下乙醇脱氢酶的酶活最高能提高到210%。

关键词  乙醇脱氢酶；醋酸菌；pH稳定剂

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 食醋的概述-1

1.2 食醋发酵工艺-1

1.3 醋酸菌的概述-1

1.4 乙醇脱氢酶的来源及作用机制-1

1.4.1 乙醇脱氢酶的来源-1

1.4.2 乙醇脱氢酶的类型-2

1.5 乙醇脱氢酶酶活影响因素及应用-2

1.5.1 乙醇脱氢酶酶活影响因素-2

1.5.2 乙醇脱氢酶的应用现状-2

1.6 乙醇脱氢酶的发展前景-3

1.7 本文研究的意义和内容-3

1.7.1 本文研究的意义-3

1.7.2 本文研究的内容-3

2 材料与方法-4

2.1 试验材料-4

2.1.1 菌种-4

2.1.2 培养基的制备-4

2.1.3 主要仪器-4

2.1.4 主要试剂-5

2.2 试验方法-6

2.2.1 醋酸菌的斜面活化与摇瓶发酵-6

2.2.2 发酵液中乙醇脱氢酶粗酶液的提取与酶活鉴定-6

2.2.3 酶的pH稳定性研究-7

2.2.4 不同物质对乙醇脱氢酶酶活的稳定性影响-7

3 结果与分析-9

3.1 酶的pH稳定曲线-9

3.2 酶的pH稳定剂筛选-9

3.2.1 酶的pH稳定剂初筛-9

3.2.2 酶的pH稳定剂复筛-11

3.3 正交确定最佳稳定剂组合-14

3.3.1 正交试验-15

3.3.2 验证试验-16

3.3.3 对比试验-16

结论-17

致谢-18

参考文献-19