蝉拟青霉发酵液中单增李斯特菌抑菌活性成分的分离.doc

摘要:以单增李斯特菌为指示菌，对蝉拟青霉发酵液中的抑菌活性成分进行分离。实验结果表明：蝉拟青霉发酵液对单增李斯特菌具有抑菌活性。分别用有机溶剂乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚以1:1体积比对发酵液进行萃取，以抗生素为阳性对照，无菌水为阴性对照，对有机溶剂相和水相进行抑菌试验，结果发现发酵液乙酸乙酯相的抑菌效果最好。对乙酸乙酯相进行展开，最终展开剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水体积比16:0.3:3:1可将乙酸乙酯相分离为7个组分，分别标记为组分1、2、3、4、5、6、7。使用制备薄层制备各组分样品，并用12.5%的DMSO溶解进行抑菌试验，发现组分3抑菌效果最好。采用二倍体积稀释法测定组分3的最小抑菌浓度，当指示菌菌悬液浓度为108 cell/mL时，其最小抑菌浓度为0.625ug/mL。

关键词：蝉拟青霉菌；发酵液；抑菌活性物质；分离；最小抑菌浓度

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 蝉拟青霉简介-1

1.1.1蝉拟青霉定义-1

1.1.2蝉拟青霉研究现状-1

1.2蝉拟青霉抗菌性研究-4

1.3本试验研究目的-4

2 材料和方法-5

2.1 实验材料-5

2.1.1 实验菌种-5

2.1.2 化学试剂-5

2.1.3 仪器-5

2.1.4 培养基配方-6

2.2实验方法-6

2.2.1蝉拟青霉摇瓶发酵培养-6

2.2.2发酵液处理-6

2.2.3抑菌试验-6

2.2.4乙酸乙酯粗体物的TLC分离-7

2.2.5最小抑菌浓度试验-8

2.2.6纯度鉴定-TLC鉴定-8

3结果与分析-9

3.1发酵液的抑菌试验-9

3.2发酵液萃取相的抑菌试验-9

3.3乙酸乙酯粗提物的展开-10

3.4分离组分的抑菌活性鉴定.10

3.5最小抑菌浓度-10

3.6纯度鉴定（TLC鉴定）-11

结论-13

致谢-14

参考文献-15