高污染土壤农药降解菌驯化及筛选条件优化.doc

摘要:由于人类生产生活，尤其是粮食蔬菜的生产方面，大量的农药使用，造成了土壤严重污染。这一结果威胁着人类的生命健康。生物修复是这些年治理农药污染最有效和最重要的途径，具有广阔的应用前景。本实验的土样取自农药厂污水处理池。采用稀释平板法对微生物进行分离筛选，挑取单菌落接种到富集培养基中富集培养，接着在基础培养基继续驯化培养，而后采用平板划线法分离纯化，得到一株降解性能较好的菌株，将其命名为菌J5。然后用生理生化实验来鉴定菌株J5。生理生化实验结果表明该菌为革兰氏阳性菌，不能水解淀粉并且在糖代谢中不能产生丙酮酸。通过生理生化和16SrDNA基因序列鉴定初步鉴定菌株J5为Bacillus anthraci（芽孢杆菌属）。在对该菌株筛选条件优化的研究后（主要研究的筛选条件有温度、碳源浓度和培养基pH)，可以得出该菌最适生长温度为30℃，最适生长的碳源浓度为300mg/L，最适生长的培养基pH为10。本次实验为后续的研究做了准备。

关键词 农药；分离筛选；生理生化；生长条件优化；降解谱

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 农药的概述-1

1.1.1 农药的定义及特点-1

1.1.2 环境中农药的危害-1

1.2 有机磷农药的概述-1

1.2.1 有机磷农药发展与使用-1

1.3 有机磷农药治理-1

1.3.1 获得降解菌株的途径-2

1.3.2 降解有机磷农药的微生物-2

1.4 本论文研究的目的及意义-3

2降解菌的筛选与鉴定-4

2.1 材料-4

2.1.1 菌种-4

2.1.2 待测农药-4

2.1.3 培养基-5

2.1.4药品-7

2.1.5 仪器-8

2.2 筛选与鉴定-8

2.2.1 驯化筛选-8

2.2.2 生理生化鉴定-10

2.2.3 16S rDNA鉴定-11

2.2.4菌株生长条件的优化-12

2.2.5菌株降解谱实验-13

3 结果与分析-14

3.1 降解菌的生理生化特性-14

3.2 16S rDNA测序结果-15

3.3 降解菌的生长条件优化-16

3.3.1单因素实验结果分析-16

3.4 菌株降解谱实验结果-20

结论-22

致谢-23

参考文献-24