海水中叶绿素a的提纯与优化方法研究.doc

摘要:大连属于沿海城市，海水资源丰富，近年来，大连海水营养化程度越来越高，海水污染越来越严重。海水质量的恶化对海洋生态系统造损坏，对环境也造成严重破坏。叶绿素a是植物光合作用的重要色素，叶绿素a含量越高，海水营养化越严重，因此可通过检测叶绿素a的含量来检测海水的污染程度。分别通过比较不同滤膜、不同萃取溶剂、组织研磨与提取液静置、研磨过程是否加MgCO3来选取最佳的提取叶绿素a的方式，提高叶绿素a的提取效率。对海水初级生产力测试过程进行了优化，探究出了效率高，灵敏度高，准确度高的方法。

结果显示，醋酸纤维滤膜相对其他两种滤膜过滤效果好，所含叶绿素a含量高；从提取方式看，组织研磨效果更好，单单静置过夜，平行结果相差偏，表示静置过夜均匀性不好，可能影响检测结果，同时，冰浴研磨效果更好；MgCO3可以防止酸化引起色素降解，研磨属于有外力作用，在这个过程中叶绿素会有一定的损失，经过实验进行比较，能看出加入MgCO3的样品所提取出来的叶绿素a含量高；DMF具有很小的挥发性，能够高效的提取叶绿素，但是它对单细胞绿藻提取效率低，不能完全提取其叶绿素，并且具有很高的毒性；热乙醇法条件不好控制，叶绿素a在高温状态下会遭到破坏；丙酮能够很好的提取叶绿素。

关键词：叶绿素a；分光光度法；滤膜；提取效率

目录

摘要

Abstract

1 本课题的目的及意义，研究现状分析-1

1.1 选题的目的及意义-1

1.2 研究现状分析-1

1.2.1 直接浸泡提取法-1

1.2.2 浸泡研磨提取法-1

1.2.3 超声波浸泡提取法-2

1.3叶绿素a的测定方法现状-2

2 国内外研究现状（文献综述）-4

2.1 HPLC法测定叶绿素a含量发展现状-4

2.2 分光光度法测定叶绿素a含量发展现状-4

2.3 荧光法测定叶绿素a含量发展现状-5

2.4 其他方法-6

3 实验材料与方法-7

3.1 实验试剂-7

3.2 实验仪器-7

3.3 实验原理-7

3.4 方法简介-7

3.5 叶绿素不同滤膜提取方法的实验-8

3.6 叶绿素组织研磨与提取液静置的实验-8

3.7 叶绿素研磨过程是否加MgCO3的实验-9

3.8 叶绿素不同提取液提取方法的实验-9

4 结果讨论-10

4.1 三种滤膜对90%丙酮吸光度的影响-10

4.2 三种滤膜对叶绿素a含量测定的影响-10

4.3 叶绿素组织研磨与提取液静置的实验-11

4.4 叶绿素研磨过程是否加MgCO3的实验-12

4.5 叶绿素不同提取液提取方法的实验-13

4.5.1 萃取溶剂的比较-13

4.5.2 三种萃取方法测定结果比较-14

5 结论-15

6 参考文献-16

7 致谢-18